Аналіз ПЛР - найточніша діагностика на інфекції

1. Які інфекції можна діагностувати методом ПЛР
2. Суть методу полімеразної ланцюгової реакції
3. Переваги і недоліки методу ПЛР
4. Як здати аналіз ПЦР правильно: підготовка
5. Мазок у жінок
6. Мазок у чоловіків
7. Аналіз крові
8. Як проводиться тест ПЛР?
9. Як розшифрувати ПЛР аналіз
10. Точність розшифровки результатів ПЛР аналізу

Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) - це сучасний інструмент діагностики різноманітних інфекцій, що відрізняється високою точністю. Аналіз ПЛР дозволяє визначати збудників інфекційних захворювань, спираючись на їх генетичний матеріал (РНК або ДНК). Біологічним матеріалом для дослідження може служити кров, мазок із статевих органів, слина та інше.

КОНСУЛЬТАЦІЯ ЗА РЕЗУЛЬТАТАМИ АНАЛІЗІВ або УЗД - 500 руб.

Метод ПЛР був відкритий в 1983. Його творець Кері Мюлліса (США), за це відкриття отримав Нобелівську премію в галузі хімії. Вже за перші десять років методика стала обов'язковим лабораторним дослідженням у всьому світі, отримавши визнання вчених і лікарів.

Медичний центр Діана пропонує провести дослідження за методикою полімеразної ланцюгової реакції в найкоротші терміни і з високим рівнем точності. Наша діагностична база відповідає всім міжнародним стандартам і вимогам.

Які інфекції можна діагностувати методом ПЛР

Зміст статті

На діагностику відправляють гінеколог , уролог або дерматолог . А нализ ПЛР дає можливість діагностувати велике число різноманітних інфекцій. У цю групу потрапляють і приховані, безсимптомні захворювання, що знаходяться в інкубаційному періоді:

За допомогою методу ПЛР можна виявити:

• гепатит C, B;
• уреаплазмоз статевих органів;
• ІПСШ - уреаплазмоз, трихомоніаз, гарднерельоз ,;
• хламідіоз статевих органів і дихальних шляхів;
• мікоплазмоз статевих органів і дихальних шляхів ;
• бактеріальний вагіноз;
• кандидоз статевих органів ;
• інфекційний мононуклеоз;
• туберкульоз;
• сальмонельоз;
• туберкульоз (легеневі та позалегеневі форми);
• лістеріоз, кліщів енцефаліти, хвороба Лайма;
• цитомегаловирусную , Папіломавірусну, герпесних інфекцію ;
• дитячі інфекційні хвороби, які виявляються при вагітності і до зачаття - краснуху , Паротит, дифтерію, кір;
• ВІЛ.

При кожному з перерахованих вище захворювань, виявлених іншим методом, бажано робити і ПЛР - дослідження. Збудники багатьох інфекцій мають кілька типів (штамів), а більш точна діагностика робить лікування ефективніше. Оскільки різні типи збудників володіють своїми способами передачі інфекції, точне визначення збудника допомагає вберегти від зараження оточуючих. Наприклад, гепатитом А можна заразитися через загальні предмети і посуд (хвороба брудних рук), а гепатитом С - тільки через кров, медичні інструменти і статеві контакти. Це важливо для тих, хто знаходиться поруч з хворим.

Суть методу полімеразної ланцюгової реакції

Метод заснований на виявленні збудника по ділянках ДНК або РНК. ПЛР нагадує криміналістику, коли злочинця знаходять по частинкам шкіри або волосся, залишених на місці злочину. Оскільки кожен живий організм має унікальну структуру ДНК або РНК. Метод дозволяє безпомилково ідентифікувати мікроорганізм, навіть якщо він присутній в досліджуваному матеріалі в мінімальних кількостях.

ПРЦ підходить для виявлення прихованого носійства, нетипових, стертих і інших форм інфекційних захворювань. Діагностика відрізняється високою точністю, тому практично не дає помилок і помилкових результатів. Аналіз часто призначається, як додаткове обстеження, щоб виявити конкретний тип вірусу або мікроба.

Переваги і недоліки методу ПЛР

Аналіз ПЛР - результативний діагностичний інструмент, що дозволяє лікарю не тільки правильно визначити тип інфекційного збудника в організмі хворого, але також і кількість мікробів. Ця особливість дозволяє методом ПЛР ефективно виявляти і хронічні інфекції, наприклад, вірусний гепатит.

Переваги методики полягають в наступних особливостях:

• Універсальність. Метод дає можливість визначити всі відомі на сьогоднішній день мікроорганізми, незалежно від виду досліджуваного матеріалу.
• Специфічність. ПЛР дозволяє визначити ДНК вірусу або бактерії зі 100% точністю, що не дає жоден інший спосіб діагностики.
• Чутливість - навіть один дрібний «уламок» ДНК або РНК може бути виявлений і ідентифікований, завдяки швидкій реакції освіти копій.
• Оперативність - поставити діагноз на підставі полімеразної ланцюгової реакції можна вже через кілька годин після забору біологічного матеріалу, що дає можливість своєчасно розпочати лікування захворювання.
• Можливість проведення кількісного аналізу. Ця особливість важлива при виявленні хвороб, викликаних умовно-патогенною флорою (наприклад, молочниці). Підвищений вміст грибків кандида в організмі викликає захворювання, а нормальна кількість до 10 3 - 104 КУО / Тампі. - немає.

Недоліки ПЛР-діагностики - це необхідність в високотехнологічному обладнанні і висококваліфікованих фахівцях. Для аналізу потрібен спеціальний бокс-ламінар, де підтримується необхідна температура і забезпечується чистота експерименту.

Як здати аналіз ПЦР правильно: підготовка

Щоб зрозуміти, як саме слід підготуватися до майбутнього аналізу ПЛР, пацієнт повинен обов'язково уточнити у свого лікаря, який саме біологічний матеріал планується взяти. Від цього безпосередньо залежить підготовка.

• Виділення зі статевих органів, мазок з шийки матки або сечівника, сеча - за допомогою дослідження даних видів сировини методом ПЛР ефективно діагностуються інфекції статевих органів.
• Вірусний гепатит C, ВІЛ інфекція вимагають взяття крові на аналіз ПЦР.
• За допомогою мазка із зіву можна підтвердити або спростувати факт наявності інфекційного мононуклеозу.

Мазок у жінок

Для діагностики статевих інфекцій методом ПЛР у жінок, як правило, беруть мазок з піхви. При вагітності діють стандартні правила підготовки до аналізу ПЛР.

• За пару днів до проведення ПЛР потрібно відмовитися від спринцювань, засобів інтимної гігієни.
• За тиждень до аналізу на інфекції варто перестати застосовувати будь-які види лікарських препаратів, зрозуміло, якщо вони не входять в програму підготовки до аналізу ПЛР, прописану лікарем.
• За пару днів до обстеження потрібно почати утримуватися від статевого акту.
• Підмивання в день аналізу ПЛР не потрібно, гігієна статевих органів проводиться напередодні ввечері, використовується тільки тепла вода.
• За пару годин до здачі аналізу мочитися не можна.

Мазок у чоловіків

Підготуватися до паркану мазка із сечовивідного каналу для проведення ПЛР нескладно. Досить дотримуватися викладені нижче правила.

• За 2 доби до ПЛР обстеження потрібно почати утримуватися від сексуальних відносин.
• Прийом ліків припиняється приблизно за 7 днів до проведення аналізу, якщо, звичайно ж, вони не були спеціально призначені лікарем.
• Гігієна статевих органів повинна проводитися напередодні ввечері, в день аналізу ПЛР це робити не варто.
• Рекомендується не мочитися приблизно 2-3 години перед здачею аналізу.

Аналіз крові

Якщо в процесі ПЛР аналізу об'єктом вивчення стане кров пацієнта, правила підготовки до нього наступні.

• Оптимальний час для здачі крові - ранок, аналіз потрібно обов'язково здавати натще (мінімум 8 годин відсутності їжі). Воду можна пити вільно.
• Відмова від алкоголю за добу до ПЛР аналізу, відмова від куріння за годину до нього.
• Якщо здоров'я допускає такий варіант, від прийому лікарських засобів рекомендується на час відмовитися.
• Перед здачею проб крові в обов'язковому порядку слід відпочити близько 20 хвилин.
• Напередодні ПЛР дослідження абсолютно виключені емоційні та фізичні перевантаження, вони можуть позначитися на результатах аналізу.

Як проводиться тест ПЛР?

Для дослідження береться будь-яке середовище, в якій може перебувати збудник, але найчастіше використовуються:

• Кров сироватка або плазма - для виявлення безлічі збудників - вірусів гепатиту B, C, D, G, герпесу, ВІЛ, цитомегаловірусу;
• Сеча і сік простати - при діагностиці ЗПСШ;
• Мокрота, плевральна рідина, бронхоальвеолярний лаваж - для діагностики легеневих і позалегеневих форм туберкульозу;
• Спинномозкова рідина - для діагностики інфекцій нервової системи;
• Навколоплідної рідини - для визначення внутрішньоутробних заражень;
• Мазок із зіву - для виявлення збудників інфекційного мононуклеозу і дифтерії;
  зіскрібки і мазки зі слизових для діагностики ЗПСШ;
  клітини слизової шлунка і шлунковий сік - для виявлення бактерії хелікобактер, викликає гастрит і виразку.

При одному взяття матеріалу можна виявити відразу декількох збудників, що потрапили в організм. Така універсальність позбавляє пацієнта від додаткових обстежень і зайвих витрат.

Виявити та ідентифікувати ділянки генетичної інформації вдається за допомогою спеціальних еталонних маркерів ДНК (праймерів) створених для кожного відомого збудника. Еталон дозволяє знайти «свій» фрагмент серед мільйонів інших. Якщо це відбувається, запускається реакція полімеразної ланцюга.

ПЛР-реакція робить величезну кількість копій виявленого ділянки генної інформації (реплікацію). Важливо, що реплікуються тільки ділянки ДНК і РНК, необхідні для проведення аналізу. Тому так важливі чистота експерименту і вміння персоналу звертатися з апаратурою і зразками.

Ланцюгова реакція протікає дуже швидко, вже через дві години ділянку ДНК збільшується в мільйони разів, що дозволяє виявити і точно ідентифікувати інфекцію. Для роботи з еталонами пробірки поміщають в спеціальний прилад. За допомогою програми задається алгоритм, кілька разів змінює температуру середовища і впливає на перебіг реакції. Результат ПЛР видно відразу після закінчення дослідження.

Як розшифрувати ПЛР аналіз

Проведення ПЛР дослідження дозволяє не просто встановити тип інфекції, присутній в організмі хворого, а й оцінити його з кількісної точки зору (кількість мікробів). Розшифровка результатів кількісного аналізу ПЛР грає важливу роль у виявленні та перевірці ефективності лікування великого числа хронічних захворювань, скажімо гепатиту C.

Результатом аналізу ПЛР можуть стати позитивний і негативний відповіді.

• Негативний результат. Сліди інфекції не були виявлені в біологічному матеріалі, який був об'єктом дослідження в процесі аналізу ПЛР. Як правило, на підставі негативного результату можна вважати, що в організмі дійсно відсутня інфекція.
• Позитивний результат. Такий результат аналізу ПЛР свідчить про те, що сліди інфекційного захворювання присутні в біологічному матеріалі пацієнта. Позитивний результат аналізу ПЛР характеризується великим ступенем точності.

Іноді інфікування виявляється на тлі повного здоров'я і відсутності ознак захворювання. Деякі хворі вважають, що аналіз зроблений неправильно, але реальна ситуація інша. Якщо ПЛР показала, що збудник в організмі є, значить, він там дійсно знаходиться. Просто інфекційні хвороби ніколи не починаються відразу після зараження, маючи інкубаційний період різної тривалості.

Прихований період може тривати дуже довго, наприклад, при СНІДі - кілька років, поки якісь механізми не підштовхнуть віруси до розмноження. Збудник визначається в організмі носіїв і тих, хто не долікувався. Дуже часто переходять в приховану (латентну) форму різні ЗПСШ. У цьому випадку може знадобитися додаткова лабораторна діагностика.

Точність розшифровки результатів ПЛР аналізу

Метод ПЛР, що дозволяє виявляти досить велика кількість інфекцій, характеризується підвищеною точністю, чутливістю і специфічністю. Ці характеристики говорять про те, що за допомогою дослідження ПЛР можна:

• Максимально точно встановити відсутність або присутність інфекційного збудника.
• Максимально точно визначити конкретну різновид інфекційного збудника (специфічність).
• Виявити інфекцію навіть у тому випадку, коли вона має прихований характер. Йдеться про низький рівень присутності в що піддається дослідженню біологічному матеріалі пацієнта ДНК мікробів (чутливість).

Переваги методу ПЛР над імуноферментним аналізом та іншими імунологічними інструментами виявлення інфекції полягає в тому, що він рідше дає помилкові результати. Тобто розшифровка аналізу ПЛР значно рідше показує відсутність інфекційних мікробів, якщо вони є в організмі хворого.

Крім того, майже не буває, щоб розшифровка аналізу виявляла наявність в організмі неіснуючої інфекції, тобто давала хибнопозитивні результати.Разумеется, стовідсотково правильними результати ПЛР назвати все ж не можна, тому необхідно обов'язково доповнювати це дослідження іншими методиками.

Якщо ви знайшли помилку, будь ласка, виділіть фрагмент тексту і натисніть Ctrl + Enter

Поділитися посиланням: