1 Гребенникова С.В. 1 Оксенюк О.С. 1 Смирнова О.Б. 1 Калмикова Ю.А. 1
1 ФГБОУ ВО «Ростовський державний медичний університет» Міністерства охорони здоров'я Російської федерації
У 40 білих щурів викликали дерматит простий дратівливий контактний і лікували різні групи тварин ін'єкціями всередину черевної порожнини «Омегавена», що містить поліненасичені жирні кислоти, кремом «Вітамін Ф99» жирним і маззю «Радевіт». Оцінювали в крові вміст малонового діальдегіду, активність супероксиддисмутази і каталази. Сприятливим виявилася динаміка компонентів перекисного окислення ліпідів і антиоксидантної системи після лікування поєднанням ін'єкцій «Омегавена» і зовнішньо - кремом «Вітамін Ф99» жирний, що містять омега-3 і омега-6 поліненасичені жирні кислоти. Показано перевагу впливу на перекисне окислення ліпідів крові при експериментальному дерматиті простому дратівливому контактному засобів, що містять омега-3 і омега-6 поліненасичені жирні кислоти, над такими протизапальної дії. Автори рекомендують застосування препаратів системної та місцевої лікування, що містять омега-3 і омега-6 поліненасичені жирні кислоти, а також антиоксиданти при запальних захворюваннях шкіри.
дерматит простий дратівливий контактний
вільнорадикальне окислення ліпідів
поліненасичені жирні кислоти
1. Касіхіна Є.І. Цитопротективного терапія в комплексному лікуванні хронічних запальних захворювань шкіри // РМЗ дерматол. - 2015. - № 19. - С. 1146-1149.
2. Кінь І.Я., Шиліна Н.М., Вольфсон С.Б. Омега-3 поліненасичені жирні кислоти в профілактиці і лікуванні хвороб дітей і дорослих // Лікуючий лікар. - 2006. - № 4. - С. 55-59.
3. Королюк М.А., Іванова Л.І., Майорова І.Г., Токарев В.О .. Метод визначення активності каталази // Лабораторна справа. - 1988. - № 1. - С. 16-18.
4. Керівництво по лабораторним тваринам і альтернативним моделям в біомедичних технологіях / під ред. Каркіщенко М.М., Грачова С.В. - М., 2010. - 358 с.
5. Сталева І.Д., Гарішвілі Т.Г. Метод визначення малонового діальдегіду за допомогою тіобарбітурової кислоти // Сучасні методи в біохімії. - М., 1977. - С. 66-68.
6. Шепелєв А.П., Шовкун Л.А. Перекисне окислення ліпідів і система антиоксидантів в нормі і при патології. - Ростов н / Д, 2012. - 363 с.
7. Amado A., Taylor JS, Sood A. іррітантних контактний дерматит // Дерматологія Фіцпатріка в клінічній практиці. - М., 2012. - Т. 1. - С. 430-437.
8. Mistra HP, Fridovich I. The role of superoxide anion in the autooxidation of epinephrine and simpl assay for superoxide dismutase // J. Biol. Chem. - 1972. - Vol. 247. - № 10. - Р. 3170-3175.
9. Ratnam DV, Ankola DD, Bhardwa V. Role of antioxidants in prophylaxis and therapy: A pharmaceutical perspective // J. Control. Release. - 2006. - Vol. 113. - P. 189-207.
Удосконалення лікування захворювань шкіри, в патогенезі яких істотна роль запалення, є актуальним завданням. В даний час увагу дослідників цієї проблеми привертають до себе засоби, що містять омега-3 і -6 поліненасичені жирні кислоти (ПНЖК). Вплив ПНЖК на запальні вогнища - відновлення мембран, антиоксидантну, ингибиция перекисного окислення ліпідів (ПОЛ) [1]. Прояв протизапального ефекту ПНЖК омега-3 - шляхом зменшення вироблення прозапальних ейкозаноїдів (простагландину Е3, лейкотриена В5), зменшення інтерлейкіну 1 і фактора некрозу пухлини [2]. Між ПНЖК і вільнорадикальним окислення ліпідів (СРОЛ) встановлено тісний зв'язок. Через стадію перекисних похідних ПНЖК відбувається біосинтез простагландинів і лейкотрієнів [6]. Недостатнє руйнування реактивних форм кисню або їх перевиробництво призводять до підвищення рівня та розвитку оксидативного стресу [9]. При цьому мембранні фосфоліпіди в першу чергу піддаються деструкції [6]. Антиоксидантний захист в шкірі включає каталази (КАТ), супероксиддисмутази (СОД) і ін. [9].
матеріали та методи
У 40 білих щурів викликали «виражену опікову травму» в передній області спини: металеву пластину площею 3,8 см квадратних і товщиною в 1,5 мм, використану для опіку, нагрівали на електричній плитці з закритою спіраллю при початкових проявах почервоніння покриває спіраль металевої частини і накладали її на шкіру білого щура протягом 3 сек. Викликаючи так у білих щурів дерматит простий дратівливий контактний (ДПРК), ми виділили 4 групи тварин, з яких 1-я група - контрольна (без ДПРК). Експериментальне дослідження виконано з дотриманням Міжнародних принципів Європейської конвенції про захист хребетних тварин з урахуванням норм і правил біомедичної етики (з дозволу етичного комітету РостГМУ - протокол № 16/13 від 14.11.2013 р) [4]. Всім щурам з ДПРК 1 раз в 3 дня для профілактики піодермії на осередки наносили «ерітроміціновая мазь». Друга група - порівняння з ДПРК без лікування протягом 4 днів; тварин 3-ї групи лікували маззю «Радевіт» (щоденні змащування осередку ураження протягом 11 днів); щури 4-ї групи отримували щодня ін'єкції всередину черевної порожнини по 1,0 мл «Омегавена», а також змазування вогнищ ураження - крем «Вітамін Ф 99» жирний. Кров отримували від тварин 3-4 груп після 11 днів лікування, і до цього часу прояви ДПРК вже ставали значно слабше [1; 7].
Мазь «Радевіт» рекомендована для лікування дерматитів контактних, опіків, проявляє протизапальну дію. У групі 4-й застосовували ін'єкції «Омегавена», що має в складі омега-3 і -6 ПНЖК, а зовнішньо - крем «Вітамін Ф 99» жирний, діючою речовиною в якому є вітамін F - джерело незамінних ПНЖК, ефіри омега-3 жирних кислот і ін.
З компонентів ПОЛ оцінювали зміст малонового діальдегіду (МДА) [5], антиоксидантну систему (АОС) характеризувала активність супероксиддисмутази [8] і каталази [3] в сироватці крові.
Результати та обговорення
Ми провели аналіз в групі експериментальних тварин з ДПРК, розвиненому після «вираженою опікової травми». З таблиці видно, що в 1-й (контрольній) групі білих щурів без ДПРК показники в сироватці крові склали: МДА - 6,23 ± 0,44 нмоль / мл, СОД - 23,83 ± 1,57 ум. од. / мл і КАТ - 44,31 ± 3,47 ОД / мл х хв. У 2-й групі (порівняння) - кров отримували від тварин з ДПРК після 4 днів від вираженої опікової травми без якогось лікування. При цьому запальна реакція в осередках ураження була значною. Вміст МДА дорівнювала 7,06 ± 0,47 нмоль / мл, активність СОД - 11,81 ± 1,09 ум. од. / мл, КАТ - 33,55 ± 1,45 ОД / мл х хв. Зіставлення цих показників з такими «здорових» щурів контрольної групи виявило істотне зниження показників антиоксидантного захисту - СОД в 2 рази (Р <0,001) і КАТ в 1,3 рази (Р <0,05). При цьому вміст МДА проявило деяку тенденцію до зростання (в 1,1 рази). Тим самим визначається декомпенсація системи СРОЛ (оксидативний стрес) - замість адекватного ситуації підвищення активності компонентів антиоксидантної системи спостерігається зниження їх активності. Отримані при дослідженні показники представлені в таблиці.
Компоненти вільнорадикального окислення ліпідів крові білих щурів при різних методах лікування (виражена опікова травма)
Групи експериментальних білих щурів (в кожній групі n = 10)
МДА в нмоль / мл
СОД в ум. од. / мл
КАТ
ОД / мл х хв
1-я гр. - «контрольні» білі щури без ДПРК
6,23 ± 0,44
23,83 ± 1,57
44,31 ± 3,47
2-я гр. порівняння - 4 дні після опікової травми без лікування
7,06 ± 0,47
11,81 ± 1,09 *
33,55 ± 1,45 *
3-тя гр., Лікування - маззю «Радевіт» (11 дн.)
8,80 ± 0,39 *; 2 *
32,30 ± 5,80; 2 *
38,60 ± 0,91; 2 *
4-я гр., Лікування - «Омегавен» і крем «Вітамін Ф 99» жирний (11 дн.)
7,88 ± 0,65
33,42 ± 7,40; 2 *
48,60 ± 2,79; 2 *; 3 *
Примітка. Відмінності істотні: з контрольною групою - *, з групою порівняння - без лікування 4 дні після вираженої опікової травми - 2 *, з групою 3 таблиці - 3 *.
Наступні 2 групи тварин отримували лікування різними методами. Білі щури 3-ї групи (по суті, також 2-я група порівняння) отримували щоденні змащування вогнища ДПРК офіційно рекомендованої для лікування контактних дерматитів і опіків маззю «Радевіт». Після 11 днів лікування ДПРК зміст в сироватці крові МДА виявився підвищеним - 8,80 ± 0,39 нмоль / мл (Р <0,001) в 1,4 рази. Зростання в порівнянні з групою 2 (Р <0,05) відзначений в 1,3 рази. У той же час активність СОД зростала в порівнянні з показником групи 2 - в 2,7 рази (Р <0,001) до 32,30 ± 5,80 ум. од. / мл, а в зіставленні з контрольною групою відзначена тенденція до переважання в 1,4 рази. Аналогічна СОД динаміка встановлена в цій групі і за активністю каталази. Активність цього найважливішого ферменту антиоксидантного захисту - 38,60 ± 0,91 ОД / мл х хв перевищувала показник 2-ї групи (порівняння, 4 дня після опікової травми без лікування) в 1,2 рази (Р <0,05). Зіставлення з показником контрольної 1-ї групи виявило в 3-й групі лише незначну (в 1,2 рази) тенденцію до зниження.
Таким чином до 11-го дня лікування маззю «Радевіт» ДПРК показники СРОЛ крові виявили підвищений рівень МДА (від показника контрольної групи в 1,4 рази і від показника 2-ї групи після 4 діб опікової травми без лікування - в 1,3 рази ). Разом з тим відзначено компенсаторное наростання в порівнянні з 2-ю групою активності СОД (наростання в 2,7 рази) і КАТ (відповідно в 1,2 рази).
Експериментальні тварини 4-ї групи отримували комплексне лікування ДПРК поєднанням щоденних ін'єкцій в черевну порожнину «Омегавена» (по 1,0 мл), що містить омега-3 і омега-6 ПНЖК, з щоденними змащування вогнищ ДПРК кремом «Вітамін Ф 99» жирний, в складі якого є вітамін F - джерело незамінних ПНЖК і ефіри омега-3 жирних кислот.
Після 11 днів лікування показник МДА крові 7,88 ± 0,65 нмоль / мл не відрізняється істотно від показників 1-ї та 2-ї груп, а лише тільки проявив деяку тенденцію до переважання над показником 1-ї групи (в 1,3 рази) і 2-ї групи (тенденція в 1,1 рази).
Якщо в 3-й групі тварин, які отримували зовнішньо мазь «Радевіт», що не містить компонентів омега-3 і омега-6 ПНЖК, показник МДА після 11 днів лікування перевищував такий в групах контрольної і порівняння (1-я і 2-я), то в 4-й групі показник МДА після 11-денного комплексного лікування ін'єкціями «Омегавена» і зовнішнім застосуванням крему «Вітамін Ф 99» жирний нормалізувався і не перевищував його в 1-й і в 2-й групах.
Активність СОД в 4-й групі - 33,42 ± 7,40 ум. од. / мл суттєво - в 2,8 рази перевищувала (P <0,05) таку групи порівняння (2-й, 11,81 ± 1,09 ум. од. / мл), що демонструє виражену компенсацію стану вільнорадикального окислення ліпідів . У групі 3 (ліковані маззю «Радевіт») превалювання над групою 2 було в 2,7 рази (Р <0,01). Показник каталази крові - 48,60 ± 2,79 ОД / мл х хв в порівнянні зі «здоровими» (тобто без ДПРК) білими щурами контрольної (1-й) групи проявив тенденцію до деякого переважання (в 1,1 рази), був істотно вище такого в 2-й групі - 33,55 ± 1,45 ОД / мл х хв (в 1,5 рази; Р <0,001) і аналогічно вище (в 1,3 рази; Р <0,01), ніж в 3-й групі (38,60 ± 0,91 ОД / мл х хв), тобто у отримали зовнішнє лікування маззю «Радевіт». Таким чином, показники 4-ї групи по всьому 3 компонентів СРОЛ і АОС демонструють при порівнянні найбільш сприятливі зміни після проведеного лікування - по МДА, СОД і особливо за активністю КАТ, показник якої виявився істотно вище (Р <0,01) в 1, 3 рази, ніж в 3-й групі. Нижче виявилося зміст основного показника СРОЛ - малонового діальдегіду, зате вище - активність каталази крові. Переконливо демонструється при цьому більш сприятлива динаміка стану СРОЛ і АОС в групі експериментальних тварин, які лікувалися поєднанням ін'єкцій «Омегавена» і зовнішньо - крему «Вітамін Ф 99» жирний (4-я група), ніж лікувалися змащування вогнищ маззю «Радевіт» (3 я група). Таке підвищення ефективності дії на СРОЛ і АОС пояснюється, очевидно, впливом містяться в використаних лікувальних засобах омега-3 і омега-6 ПНЖК.
Наші дослідження компонентів СРОЛ і АОС крові у білих щурів з експериментально викликаним ДПРК при різних методах лікування дозволили спостерігати деякі закономірності. У групі 2-й з ДПРК (4 дня після опікової травми) - декомпенсація системи СРОЛ і АОС з достовірним зниженням активності СОД і КАТ крові при деякій тенденції (в 1,1 рази) до підвищення вмісту в крові МДА (оксидативний стрес). Після 11 днів лікування найсприятливішою виявилася динаміка компонентів СРОЛ і АОС в групі 4, при лікуванні поєднанням ін'єкцій «Омегавена» і зовнішньо - крему «Вітамін Ф 99» жирний, що містять омега-3 і омега-6 ПНЖК.
Ми оцінили показники вільнорадикального окислення ліпідів і антиоксидантної системи крові при експериментальному дерматиті простому дратівливому контактному в процесі парентерального і місцевого лікування з використанням засобів, що містять омега-3 і омега-6 поліненасичені жирні кислоти ( «Омегавен», крем «Вітамін Ф 99» жирний) , а також характеризується протизапальною і антиоксидантну активність маззю «Радевіт».
У групі 2-й - ДПРК після 4 днів від вираженої опікової травми і не отримували будь-якого лікування при значно вираженої запальної реакції ураженої шкіри, вміст МДА проявило тенденцію до підвищення (в 1,1 рази), а показники антиоксидантного захисту виявилися істотно зниженими : СОД в 2,0 рази і КАТ - в 1,3 рази. Подібне поєднання змісту і активності наведених вище компонентів виявляє декомпенсацию в системі СРОЛ (оксидативний стрес) в результаті вираженою опікової травми.
Тварини 3-ї групи, що одержували протягом 11 днів місцеве лікування маззю «Радевіт», характеризувалися ще зберігалася запальною реакцією в осередку на шкірі після вираженої опікової травми (дозвіл її при типі гострому ДПРК, зазначає, згідно з клінічними і гістологічним нашими дослідженнями і за літературними даними, - в період після 2 тижнів). Вміст МДА в крові виявився підвищеним у 1,4 рази (превалювання над показником групи 2 - в 1,3 рази), активність СОД перевищувала показник 2-ї групи в 2,7 рази (порівняння з контрольною групою - тенденція до переважання в 1, 4 рази). Активність КАТ перевищувала показник групи порівняння - 4 дні після вираженої опікової травми без лікування (2-я група) - в 1,2 рази, а зіставлення з контрольною групою (1-й) показало тенденцію до зниження в 1,2 рази. Такий стан компонентів СРОЛ і АОС виявляє помірну компенсаторну реакцію.
В основній дослідній групі експериментальних білих щурів (4-я група), які отримували комплексне лікування «Омегавеном» в черевну порожнину і зовнішньо - кремом «Вітамін Ф 99» жирний (обидва засоби містять омега-3 і омега-6 ПНЖК), після 11 днів терапії показник МДА не відрізнявся істотно від 1-ї та 2-ї груп (в 3-й групі після лікування маззю «Радевіт» показник МДА перевищував такий в 1-й і 2-й групах в 1,4 і в 1,3 рази відповідно). Активність СОД крові була вища за таку групи порівняння (2-й) в 2,8 рази, а КАТ - в 1,5 рази. Особливу увагу звертає на себе перевищення активності КАТ в 4-й групі в порівнянні з 3-ю групою (лікування маззю «Радевіт») - в 1,3 рази. За всіма 3 компонентів СРОЛ і АОС показники 4-ї групи були більш сприятливі, ніж в 3-й групі. Тим самим лікування ДПРК препаратами, що містять омега-3 і омега-6 ПНЖК ( «Омегавен», крем «Вітамін Ф 99» жирний), виявилося ефективнішим, ніж з протизапальною активністю (мазь «Радевіт»).
висновок
Згідно з представленими вище даними, у ході експериментального дерматиті простому дратівливому контактному у білих щурів відзначається оксидативний стрес, що зберігався до суттєвої клінічної стабілізації в осередках «вираженою опікової травми». Найбільш ефективним щодо стану показників перекисного окислення ліпідів крові виявилося лікування поєднанням «Омегавена» і крему «Вітамін Ф 99» жирний. Вдалося відзначити перевагу засобів з омега-3 і -6 ПНЖК, над таким протизапальної дії (мазь «Радевіт»). Такі результати експериментальних досліджень обґрунтовують використання в умовах клініки в системній ( «Омегавен») і місцевої терапії засобів, що містять омега-3 і -6 поліненасичені жирні кислоти, а також антиоксиданти, при комплексному лікуванні запальних захворювань шкіри: дерматиту простого дратівливого контактного, алергічного контактного дерматиту, атопічного дерматиту, нейродерміту осередкового і дифузного, псоріазу, шкірної форми пігментної кропив'янки у дітей та ін.
бібліографічна посилання
Гребенникова С.В., Оксенюк О.С., Смирнова О.Б., Калмикова Ю.А. ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНЕ ДОСЛІДЖЕННЯ ВПЛИВУ ПРЕПАРАТІВ, ЩО МІСТЯТЬ ОМЕГА-3 І ОМЕГА-6 поліненасиченими жирними кислотами, НА ПОКАЗНИКИ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕННЯ ЛІПІДІВ КРОВІ ПРИ дерматит ПРОСТОМУ дратівливість Контактна // Сучасні проблеми науки та освіти. - 2016. - № 5 .;
URL: http://www.science-education.ru/ru/article/view?id=25304 (дата звернення: 10.07.2019).
Пропонуємо вашій увазі журнали, що видаються у видавництві «Академія природознавства»
(Високий імпакт-фактор РИНЦ, тематика журналів охоплює всі наукові напрямки)
Ru/ru/article/view?