Е.А. Корнюшенко, Є.Ю. Ушакова, С.А. Ягніков
Клініка експериментальної терапії НДІ клінічної онкології РОНЦ ім. Н.Н.Блохина (Москва)
Г.Ш.Бурбаева
Лабораторія нейрохіміі Наукового Центру психічного здоров'я (Москва)
Скорочення: ІЕ- ідіопатична епілепсія, СЕ- симптоматична епілепсія, ГАМК гамма-аміномасляна кислота, ГГЦ- ГАМК, глутаматергіческій цикл, ЦНС-центральна нервова система, ГМ головний мозок, ЕП епілептиформні припадки, ЦТК- цикл Кребса, АЕП- антиепілептичні препарати.
Вступ
Епілепсія - хронічне захворювання головного мозку, що характеризується повторними нападами, які виникають спонтанно в результаті надмірної нейронної активності і супроводжуються різними клінічними і параклінічні проявами.
ІЕ не є наслідком якого-небудь іншого захворювання, її етіологія не ясна, за винятком генетичної схильності, яка призводить до функціонального дисбалансу процесів збудження і гальмування.
СЕ є проявом вродженого або набутого захворювання головного мозку, яке вже пройшло або в даний момент не активно, але привело мозок в стан готовності до припадків.
Термін «криптогенная епілепсія» вживається в тих випадках, коли клінічна картина нападу вказує на наявність в мозку локальної зони епілептичної активності, пов'язаної з порушенням морфологічної структури мозку, але виявити це порушення будь-якими клінічними діагностичними методами не вдається.
Традиційно діагноз «епілепсія» ставиться на підставі наступних даних (схема 1).
В останні роки в гуманній медицині почалася розробка нового методу диференціальної діагностики судомних нападів на підставі визначення питомої активності ферментів, задіяних в ГГц. Аналогічне дослідження проводилося в КЕТ на базі лабораторії нейрохімії НЦПЗ.
ГАМК головний гальмівний, а глутамат - збудливий медіатор в ЦНС. Синтез і інактивація цих нейромедіаторів здійснюється через альфа-кетоглутарат циклу Кребса. Можливі також взаємоперетворення ГАМК і глутамату. Дана система знаходиться в стані динамічної рівноваги, яке підтримується відповідно до принципу Ле-Шательє Брауна наступними ферментами, що знаходяться в тромбоцитах крові:
- трансфераза (ГСПБ),
- глутаматдегідрогеназа (ГДГ),
- ГАМК-трансфераза,
- цитохром-С-оксидаза (бере участь в метаболізмі ГАМК в мітохондріях),
- активується фосфатом глутамінази (ФАГ).
Надмірна активність нейронів ГМ, що має місце при ІЕ, є наслідком дисбалансу нейромедіаторів через зсув динамічної рівноваги в бік процесів збудження, на що вказує рівень ферментів в тромбоцитах крові.
цілі дослідження
- Встановити, які ферменти ГГц є найбільш значущими у розвитку ЕП.
- Оцінити перспективність даного методу в диференціальної діагностики ІЕ і СЕ.
- З'ясувати, чи можлива корекція рівня цих ферментів за допомогою сучасних АЕП, зокрема, фенобарбіталу.
матеріали та методи
Для експерименту були відібрані собаки у віці 3-4 років породи кане-корсо, що знаходяться на лікуванні фенобарбіталом ( «Паглюферал»). Вік собак, первинно надійшли в клініку зі скаргою на ЕП, становив 2 роки (лабрадор-ретривер) і 10 років (ротвейлер). Обстеження тварин за вищевказаною схемою не виявило патологій, які могли б послужити причиною ЕП. Передбачалося встановити етіологію захворювання шляхом визначення питомої активності ферментів ГГц за специфічним аналізом крові.
Дослідження являло собою взяття проб крові (натще) об'ємом 40 мл в стерильні пробірки, що містять буфер. Паралельно проводився аналогічний аналіз у контрольної групи здорових тварин, відповідних хворим собакам по масі тіла і віку.
результати
Досвід (АЕП)Досвід (АЕП)Досвід(ІЕ)Досвід(СЕ)Контрольтрансферазу5,3 2,8 2,9 4,0 3,52 ± 0,958 ГДГ 77,0 65,3 70,2 74,2 56, 66 ± 8,999 ГАМК-трансфераза 14,4 14,8 16,1 13,1 13,32 ± 1,702 глутамінази 4,3 4,8 - 4,6 4,20 ± 1,411 Цитохром-С-оксидаза 19,1 14,4 19,0 11,2 19,03 ± 6,435
Найбільш показовими в діагностиці ЕП серед ферментів ГГц є ГДГ, ГАМК-трансфераза і цитохром-С-оксидаза.
Підвищення рівня ГДГ, що спостерігалося у всіх тварин з ЕП, вказує на надмірний вміст глутамату в ЦНС. При ІЕ це пов'язано з патологічним підвищенням рівня ГАМК-трансферази, інактивуючої ГАМК. Щоб компенсувати недолік нейромедіатора, активізується цитохром-С-оксидаза, що бере участь в синтезі ГАМК в мітохондріях.
Результати аналізу крові собак, що проходять курс лікування АЕП, дозволяють переконатися, що при ІЕ фенобарбітал блокує активність ГАМК-трансферази, дозволяючи підтримувати процеси збудження і гальмування в корі ГМ в стані динамічної рівноваги.
Обговорення
Отримані результати дозволяють припустити проведення даного дослідження в якості одного з методів диференціальної діагностики ІЕ, а також, простежувати динаміку стану тварин, що знаходяться на протиепілептичної терапії, коригувати дозу і вид АЕП, вирішити питання про їх скасування. Однак, невелика кількість даних не дозволяє поки з упевненістю говорити про перспективність методу і потрібні додаткові дослідження для підтвердження його ефективності.
SUMMARY
EAKornushenkov, EYUshakova, SAYagnikov. Clinic of Experimental Therapy of NNBlokhin's Russian Cancer Research Center.
GSBurbaeva. Laboratory of Neurochemistry Mental Health Research Center
The new trends in diagnostics of epileptiform seizure in dogs .
Tests for the evaluation of glutamatergic cycle enzymes activity in dog's blood were performed.
GABA-transferasa, cytochrome-C-oxidase and glutamatdehydrogenase have the main diagnostic value among others enzymes in dogs with epilepsy. Such specific tests provide the information of the diagnosis, the evaluation of the disease dynamic and help to control the treatment plan in dogs with epilepsy.
