Повернутися до списку
ВИЯВЛЕННЯ антибіотиків і сульфаніламідів В МОЛОЦІ
Антибіотики і сульфаніламіди в молоці можна виявити хімічними та мікробіологічними методами,
а також за допомогою барвників. Необхідно систематично перевіряти молоко на наявність антибіотиків, так як вони в певній концентрації призводять до порушення технологічного процесу переробки молока.
Методи, що дозволяють виявити в молоці антибіотики, є стандартними і не вимагають великих витрат.
Хімічні методи застосовуються рідко, тому що вони дозволяють тільки враховувати наявність антибіотиків або сульфаніламідів. При специфічних дослідженнях (газова хроматографія або мас-спектрометрія) здійснюється ідентифікація характерних компонентів антибіотиків або сульфаніламідів, а також встановлюються їх кількості за певними максимумів поглинання УФ-променів (наприклад, тетрациклін). Метод електрофорезу застосовується для визначення антибіотиків в поєднанні з мікробіологічними методами.
Мікробіологічні методи засновані на використанні бактерій, що володіють чутливістю до антибіотиків або сульфаніламідів, в якості індикаторів і на їх здатності розмножуватися в молоці. При затримці росту цих бактерій (затримка росту визначається безпосередньо або побічно по метаболічної активності бактерій) робиться висновок про наявність ліків.
Проба затримки росту - це проба, заснована на дифузії речовин в агар. Наявність залишкових речовин визначають по утворенню ділянок гальмування росту бактерій (чашковий агар-дифузійний метод з використанням циліндрів, лунок на поверхні агару або дисків з фільтрувального паперу). Тест-мікробами служать стрептококи, мікрококи і спороутворюючі аероби.
При використанні окисних і відновних методів залишки антибіотиків і сульфаніламідів визначають по їх впливу на метаболічну активність тест-мікробів. У пробах молока, що містять тест-мікроби, спостерігається окислення і зрушення рН. Як індикатор для вимірювання показника рН використовують лакмусовий розчин або розчин бромкрезола пурпурного. Можна визначити наявність утворюється молочної кислоти і ферментативним шляхом. У пробі йогурту в якості додаткового критерію оцінюється ще й шар осаду.
З відновлювальних методів застосовують проби з метиленової синню або з трифенил-тетразолхлорідом безпосередньо в досліджуваному молоці, або дифузний метод з використанням агару, який містить окислювально-відновний індикатор і тест-мікроби.
При нормальному зростанні тест-мікробів в молоці, що не містить залишків лікарських речовин, спостерігається зміна кольору внаслідок зниження окисно-вос становітельного потенціалу. Описаний Краак і Толле відновний метод з діамантовим чорним індикатором є простим для виконання і досить чутливим. При відновному методі з використанням чашок Петрі з агаром залишки антибіотиків дифундують в агар з змочених досліджуваним молоком листочків фільтрувального паперу (дисків) або агар перемішується з досліджуваним молоком.
За допомогою йогурт-тесту можна визначити концентрацію пеніциліну в кількості 0,05 ME в 1 мл, а чутливість відновного тесту з використанням діамантового чорного індикатора становить 0,004-0,006 ME пеніциліну в 1 мл молока (табл. 17).
ТАБЛИЦЯ 17
Точність деяких антибіотиків при відновлювальному методі з діамантовим чорним індикатором і в йогурт-тесті
антибіотик
Концентрація в 1 мл молока
проба з діамантовим чорним
йогурт-тест
Пеніцилін-G-натрій, ME
0,004
0,05
Дегідрострептоміцін, мкг
8,0
40,0
Хлортетрациклин, мкг
0,8
3,0
Оксітотраціклін, мкг
3,0
0,7
Хлорамфенікол, мкг
2,0
12,0
Точність цих методів залежить від індивідуальної чутливості тест-штамів. Так як тест-мікроби характеризуються деякою мінливістю, то їх необхідно регулярно відчувати на чутливість.
Специфічний метод визначення пеніциліну заснований на добавці пеніцилінази до досліджуваним пробам, що призводить до інактивації наявного пеніциліну. Якщо в пробі, куди додана пеніциліназа, в порівнянні з пробою без її добавки, отримано негативний результат на вміст домішки, то можна зробити висновок про зміст пеніциліну в молоці. Напівсинтетичний пеніцилін розщеплюється в присутності пеніцилінази тільки при нагріванні до температури 85 ° С протягом мінімум 5 хв.
Діамантовий чорний індикатор по відношенню до сульфаніламідів недостатньо чутливий. Його слід використовувати тільки при високій концентрації сульфаніламідів в молоці, яка не спостерігається при парентеральному введенні, а виникає, і то на короткий час, в результаті внутрісоскового введення препарату.
При обстеженні молока на присутність інгібіторів облік сульфаніламідів, як правило, не обов'язковий, так як їх вводять в вим'я лише при гострих маститах. Однак в тому випадку, якщо треба визначити наявність сульфаніламідів в молоці, застосовують більш чутливі тест-мікроби і спеціальний агар.
При мікробіологічних методах виявлення в молоці залишкових речовин позитивну реакцію можуть давати, крім антибіотиків і сульфаніламідів, та інші сполуки: дезінфікуючі засоби, продукти життєдіяльності мікроорганізмів і консервуючі речовини.
При наявності в молоці дезінфікуючих засобів навіть в такій концентрації, яка є мінімальною для виявлення з використанням відновного методу з діамантовим чорним, змінюється його запах і смак.
Поява в молоці дезінфікуючих засобів можливо лише при неправильному або недбалому їх застосуванні.
Зазвичай в пробах молока з показником рН нижче 5,4 і числом мікроорганізмів до 2-107 в 1 мл виявляються інгібітори.
Мінімальні концентрації інгібіторів в молоці при його консервуванні формальдегідом становлять 1 мкл і при консервуванні перекисом водню - 0,02% в 1 мл.
У ФРН при систематичному дослідженні молока антибіотики були виявлені менш ніж в 1% проб. У США після введення систематичного контролю покращилася якість молока: кількість проб, в яких були виявлені антибіотики, знизилося з 7 до 0,54%. У Швейцарії антибіотики містилися приблизно в 2% проб поставляється молока.
Повернутися до списку
Посилання на цей сайт ( vetfac.narod.ru ), І на автора обов'язкове.
Якщо ви не знайшли тут того, що шукали, ви можете замовити реферат або контрольну роботу на цьому сайті. Всі роботи виконуються досвідченим викладачем мікробіології і не копіюються з сайтів рефератів. Всі подробиці можна дізнатися, пройшовши за цим посиланням.
