- Як виявити антитіла?
- Сумарні антитіла до гепатиту С
- Розшифровка аналізу на антитіла до гепатиту С
- ПЛР: виявлення антигенів гепатиту С
- Носій антитіл до вірусу гепатиту С
- Після лікування гепатиту С антитіла залишаються
У відповідь на впровадження чужорідного агента імунна система людини виробляє імуноглобуліни (Ig). Ці специфічні речовини призначені для зв'язування з чужорідним агентом і його знешкодження. Визначення противірусних антитіл має велике значення для діагностики при хронічному вірусному гепатиті С (ХВГС).
зміст
Як виявити антитіла?
Сумарні антитіла до гепатиту С
Розшифровка аналізу на антитіла до гепатиту С
ПЛР: виявлення антигенів гепатиту С
Носій антитіл до вірусу гепатиту С
Після лікування гепатиту С антитіла залишаються
Як виявити антитіла?
Антитіла до вірусу в крові людини виявляє метод ІФА (імуноферментний аналіз). Ця методика заснована на реакції між антигеном (вірусом) і імуноглобулінами (antiHVC). Суть методу полягає в тому, що в спеціальні планшети вносять чисті вірусні антигени, антитіла до якого шукають в крові. Потім в кожну лунку додають кров хворого. Якщо в ній є антитіла до вірусу гепатиту С певного генотипу, в лунках відбувається утворення імунних комплексів «антиген-антитіло».
Через деякий кількість часу в лунки додають спеціальний барвник, яке вступає в кольорову ферментну реакцію з імунною комплексом. За щільністю забарвлення проводять кількісне визначення титру антитіл. Метод має високу чутливість - до 90%.
До переваг методу ІФА можна віднести:
- високу чутливість;
- простоту і швидкість проведення аналізу;
- можливість проведення дослідження при малій кількості біологічного матеріалу;
- невисоку собівартість;
- можливість ранньої діагностики;
- придатність для скринінгу великої кількості людей;
- можливість відстежувати показники в динаміці.
Єдиним недоліком ІФА є те, що він визначає не сам збудник, а лише реакцію імунної системи на нього. Тому при всіх перевагах методу для постановки діагнозу ХВГС його недостатньо: потрібно проведення додаткових аналізів , Які виявлятимуть генетичний матеріал збудника.
Сумарні антитіла до гепатиту С
Сучасна діагностика за допомогою методу ІФА дозволяє виявити в крові пацієнта як окремі фракції антитіл (IgM та IgG), так і їх загальна кількість - antiHVC total. Ці імуноглобуліни з діагностичної точки зору є маркерами ХВГС. Що означає їх виявлення? Імуноглобуліни класу М визначаються при гострому процесі. Вони можуть виявлятися вже через 4-6 тижнів після зараження. G-імуноглобуліни є ознакою хронізації процесу. Їх можна виявити в крові через 11-12 тижнів після інфікування, а після лікування вони можуть зберігатися до 8 і більше років. При цьому їх титр поступово знижується.

Бувають випадки, коли у здорової людини при проведенні ІФА на antiHVC total виявляють противірусні антитіла. Це може бути як ознакою хронічної патології, так і наслідком самовільного лікування пацієнта. Такі сумніви не дозволяють лікарю встановити діагноз ХВГС, керуючись тільки ІФА.
Розрізняють антитіла до структурних (ядерним, core) і неструктурних (nonstructural, NS) білків вірусу. Їхньою метою кількісного визначення є встановлення:
- активності вірусу;
- вірусного навантаження;
- ймовірності хронізації процесу;
- ступеня пошкодження печінки.
AntiHVC core IgG - це антитіла, які з'являються при хронізації процесу, тому для визначення гострої фази ХВГС не використовуються. Своєї максимальної концентрації ці імуноглобуліни досягають до п'ятого-шостого місяця хвороби, а у тривало хворіють і не отримують лікування пацієнтів вони повинні бути визначені протягом усього життя.
AntiHVC IgМ є антитілами гострого періоду і кажуть про рівень віремії. Їх концентрація наростає протягом перших 4-6 тижнів хвороби, а після переходу процесу в хронічний - зменшується аж до зникнення. Повторно в крові хворого імуноглобуліни класу М можуть з'являтися при загостренні захворювання.
Антитіла до неструктурних білків (AntiHVC NS) виявляються в різні терміни хвороби. Діагностично значущими з них є NS3, NS4 і NS5. AntiHVC NS3 - найраніші антитіла до вірусу ХВГС. Вони є маркерами гострого періоду хвороби. За титру (кількості) цих антитіл визначають вірусне навантаження на організм пацієнта.
AntiHVC NS4 і NS5 - антитіла хронічної фази. Вважається, що їх поява пов'язана з ураженням тканини печінки. Високий титр AntiHVC NS5 вказує на наявність в крові вірусної РНК, а його поступове зниження - на початок фази ремісії. Ці антитіла тривалий час після одужання присутні в організмі.
Розшифровка аналізу на антитіла до гепатиту С
Залежно від клінічної симптоматики та результатів аналізу на РНК вірусу гепатиту С дані, отримані після ІФА, можуть трактуватися по-різному:
- позитивні результати на AntiHVC IgМ, AntiHVC IgG і вірусну РНК говорять про гострий процес або про загострення хронічного;
- якщо в крові виявлені лише антитіла класу G без генів вірусу, це вказує на перенесене, але вилікуване захворювання. При цьому РНК вірусу в крові немає;
- відсутність в крові і AntiHVC і РНК вірусу вважається нормою, або негативним аналізом на антитіла.
Якщо виявлені специфічні антитіла, а самого вірусу в крові немає, це не означає, що людина хвора, але і не заперечує цього. Такий аналіз вважається сумнівним і вимагає повторного дослідження через 2-3 тижні. Таким чином, якщо в крові знайдені імуноглобуліни до вірусу ХВГС, необхідна комплексна діагностика: клінічні, інструментальні, серологічні та біохімічні дослідження.
Для постановки діагнозу важливий не тільки позитивний ІФА, що означає наявність вірусу в крові в даний час або раніше, а й виявлення вірусного генетичного матеріалу.
ПЛР: виявлення антигенів гепатиту С
Вірусний антиген, а точніше його РНК, визначають методом полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР). Цей метод, поряд з ІФА, є одним з ключових лабораторних аналізів, що дозволяють лікарю поставити діагноз ХВГС. Призначається він тоді, коли отримано позитивний результат аналізу на антитіла.
Аналіз на антитіла є дешевшим, ніж ПЛР, тому саме він використовується для скринінгу деяких категорій населення (вагітних, донорів, медиків, дітей з групи ризику). Разом з дослідженням на гепатит С найчастіше проводять і визначення австралійського антигену (гепатит В).
Носій антитіл до вірусу гепатиту С
Якщо методом ІФА в крові пацієнта виявлено AntiHVC до вірусу, але ніяких клінічних ознак гепатиту С при цьому немає, це може бути трактовано, як носійство збудника. Вирусоноситель може сам не хворіти, але при цьому активно заражати контактують з ним людей, наприклад, через кров носія. У такому випадку потрібна диференціальна діагностика: розширений аналіз антитіл і проведення ПЛР. Якщо аналіз ПЦР виявиться негативним, людина, можливо, переніс захворювання латентно, тобто безсимптомно, і самостійно вилікувався. При позитивному ПЛР ймовірність носійства дуже висока. Як бути, якщо антитіла до гепатиту С є, а ПЛР негативний?
Важливо правильно трактувати аналізи не тільки для постановки діагнозу ХВГС, але і для контролю ефективності його лікування:
- якщо на тлі проведеного лікування антитіла до гепатиту С не пропадають, це вказує на його неефективність;
- якщо після противірусної терапії знову виявлені AntiHVC IgМ, це означає, що процес знову активізувався.
У будь-якому випадку, якщо за результатами аналізів РНК вірус не виявлений, але антитіла до нього виявлені, слід провести повторне обстеження, щоб переконатися в точності результату.
Після лікування гепатиту С антитіла залишаються
Чи залишаються антитіла в крові після курсу лікування і чому? Після ефективної противірусної терапії в нормі можуть виявлятися тільки IgG. Час їх циркуляції в організмі перехворів людини може становити кілька років. Головною ознакою вилікуваного ХВГС є поступове зменшення титру IgG при відсутності вірусної РНК і IgМ. Якщо пацієнт вилікував гепатит С вже давно, а сумарні антитіла у нього залишилися, потрібно провести ідентифікацію антитіл: залишкові титри IgG - це норма, а от IgМ - це несприятлива ознака.

Не варто також забувати, що бувають хибні результати аналізів на антитіла: як позитивні, так і негативні. Так, наприклад, якщо в крові є РНК вірусу (якісної або кількісної ПЛР), а антитіл до нього немає, це можна трактувати як псевдонегативну або сумнівний аналіз.
Причин появи помилкових результатів кілька:
- аутоімунні захворювання;
- доброякісні та злоякісні пухлини в організмі;
- важкі інфекційні процеси; після щеплення (від гепатитів А і В, грипу, правця);
- лікування інтерфероном-альфа або імунодепресантами;
- значне підвищення печінкових показників (АСТ, АЛТ);
- вагітність;
- неправильна підготовка до здачі аналізу (прийом алкоголю, вживання жирної їжі напередодні).
При вагітності відсоток помилкових аналізів досягає 10-15%, що пов'язано зі значною зміною реактивності організму жінки і фізіологічним пригніченням її імунної системи. Не можна ігнорувати також людський фактор і порушення умов проведення аналізу. Аналізи проводяться «ИНВИТРО», тобто поза живих організмів, тому лабораторні помилки мають місце бути. До індивідуальних особливостей організму, які можуть впливати на результати дослідження, відносяться гіпер- або гипореактивность організму.
Аналіз на антитіла, незважаючи на всі свої переваги, не є 100% -ним приводом для постановки діагнозу. Ризик помилок є завжди, тому, щоб уникнути можливих помилок, потрібно комплексне обстеження пацієнта.
Як виявити антитіла?Що означає їх виявлення?
Як бути, якщо антитіла до гепатиту С є, а ПЛР негативний?