Керівництво по «вирощуванню» зубів, або біоінженірінг в стоматології

1. Зуб за зуб
2. Звідки беруться зуби, або одонтогенез in vivo
3. Негонконгская «Тріада»
4. Що нам варто зуб побудувати?
5. рецепт готовий
6. Вперед в майбутнє!

Стаття на конкурс «біо / мовляв / текст»: Все ще боїтеся стоматологів? Тоді ця стаття для вас! Давайте на секунду уявимо, що бормашина затихла, і її звук більше не потурбує вас ніколи, а інструменти для видалення зубів так і залишилися в нерозкриті крафт-пакеті. «Таке можливо?» - запитаєте ви. «Так! - відповім вам я. - Адже в той самий момент на перших шпальтах буде миготіти інтригуюча новина - вперше вирощений і імплантований людині зуб ... Успішно ... »

Ця робота опублікована в номінації «Вільна тема» конкурсу «Біо / мовляв / текст» -2017 .

Генеральний спонсор конкурсу - компанія «Діаем» : Найбільший постачальник обладнання, реагентів та витратних матеріалів для біологічних досліджень і виробництв.

Спонсором призу глядацьких симпатій і партнером номінації «Біомедицина сьогодні і завтра» виступила фірма « Інвітро ».

«Книжковий» спонсор конкурсу - « Альпіна нон-фікшн »

... Кажуть, зло не має особи. Дійсно, на його обличчі не відбивалося ніяких почуттів. Ні проблиску співчуття не було на ньому, але ж біль просто нестерпна. Хіба він не бачить жах в моїх очах і паніку на моєму обличчі? Він спокійно, можна сказати, професійно виконував свою брудну роботу, а в кінці чемно сказав: "Прополощіть рот, будь ласка ..."

Так описує відвідування стоматолога Ден Ендрюс в своєму оповіданні «Безталанна». І дійсно, з дитинства ми з неймовірним «трепетом» ставимося до таких фахівців, як стоматологи. Що тільки не роблять батьки, щоб змусити своїх дітей хоча б зайти в кабінет до лікаря, намагаючись не думати про те, що чекає їх далі. Та й часом у дорослої людини душа йде в п'яти при вигляді численних інструментів. Іноді для цього достатньо лише виду стоматологічної клініки.

В результаті стан порожнини рота і твердих тканин зубів у всьому світі не вселяє надію на майбутнє без карієсу. Незважаючи на успіхи, досягнуті в стоматологічному лікуванні, втрата зубів залишається однією з найбільш істотних проблем. Так, за даними ВООЗ, основними причинами втрати зубів є карієс і пародонтит . Повна втрата зубів особливо широко поширена серед літніх людей. У глобальних масштабах приблизно у 30% людей у ​​віці 65-74 років відсутні зуби через запальних захворювань пародонту і патології твердих тканин зубів [1] .

Тому не дивно, що стан порожнини рота у населення не тільки в Росії, але і в світі є серйозною проблемою, пропонуючи можливості як для вивчення, так і, що більш важливо, - для пошуку нових способів лікування. Одним з них стала тканинна інженерія - міждисциплінарна галузь, метою якої є створення біологічних заступників, які відновлюють і підтримують функції тканини або органу. Досить висока ефективність методів тканинної інженерії і їх потенціал змусили звернути на себе увагу багатьох діячів науки. Це ж сприяє їх нев'янучої популярності в різних сферах медицини і до цього дня.

Зуб за зуб

Перші спроби стоматологічного лікування люди зробили дуже давно. При розкопках в Єгипті археологи виявили вирізаний з раковини молюска штучний зуб в щелепі людини, що жила п'ять з половиною тисяч років тому (рис. 1) [2] .

Малюнок 1. Вид вестибулярної поверхні зуба, вирізаного з раковини. Інтервал відміток по краях - 1 мм.

Крім «зуба з морепродуктів» знайшли реімплантірованние зуби в щелепі молодої жінки, причому всі вони були не на своїх «місцях»: замість верхнього центрального різця альвеола містила ікло. Ці зуби мали всі ознаки інтеграції, тобто зрощення з живою тканиною [3] . Таким чином, виявляється, вже в цей час були зроблені перші кроки в стоматології, але, що більш дивно, також і в області тканинної інженерії.

Але, запитаєте ви, як можуть бути пов'язані стоматологія і тканинна інженерія, не рахуючи того, що кілька тисячоліть тому один єгиптянин цінував свою посмішку так, що замінив втрачений зуб чужим? Дуже навіть можуть, адже на даний момент не існує панацеї для лікування пацієнта, якому поставлений діагноз часткової або повної адентії, тобто відсутності зубів. До того ж втрата навіть одного зуба призводить до зміни не тільки естетичних параметрів, але, що більш важливо, до порушення первинної обробки їжі і погіршення мови. Не варто також забувати, що при втраті зубів - будь то в результаті травми або каріозного процесу і його ускладнень - змінюється стан зубощелепної системи в цілому, що погіршує прогноз і ускладнює подальше лікування.

Для того щоб компенсувати функції втраченого зуба, зараз використовують ортопедичні конструкції і імплантати (рис.2). Все ж це «штучні» замінники: у них відсутні судини, нервові закінчення, рецептори. Також одним з найбільш важливих аспектів є відсутність периодонтальной зв'язки у імплантату, до недавнього часу вважався золотим стандартом лікування при відсутності зубів.

Малюнок 2. Будова зуба і імплантату. Natural tooth - зуб. Artificial crown - штучна коронка. Gingiva - ясна. Implant - імплантат. Osteointegration - остеоинтеграция. Periodontal ligament - періодонтальна зв'язка.

периодонт - це високоспеціалізована фіброзна сполучна тканина, що складається з клітин і позаклітинного матриксу. Вона розташовується між цементом, що покриває корінь зуба, і кістковою тканиною, яка формує стінку лунки. У людини періодонтальна зв'язка сприяє зміцненню зуба в альвеолі, забезпечує механічну стійкість до впливу жувальних сил на зуб, розподіляючи прикладена тиск: сила всіх жувальних м'язів становить ні багато ні мало 390 кг [4] .

Що ж не так з імплантатом?

По-перше, як вже було описано вище, - це відсутність периодонтальної зв'язки. Імплантат утримується за рахунок остеоінтеграції, тобто за допомогою анатомічної зв'язку з кістковою тканиною. На відміну від зуба, у якого є невелика фізіологічна рухливість, імплантат нерухомий. Якщо ж навколо імплантату з'являється подобу сполучної тканини, то це означає тільки одне - періімплантіт , Тобто запальний процес в кісткової тканини, що оточує імплантат. У більшості випадків розвитку даного сценарію імплантат підлягає видаленню [5] .

По-друге, імплантат не може бути з'єднаний в загальну конструкцію з рештою зубами пацієнта через відсутність зв'язкового апарату і нездатності адекватного розподілу тиску. Тут працює принцип: хто сильніший, той в зубному ряду. Або імплантат не дозволить зубу рухатися, що призведе до атрофії тканин пародонта і втрати зуба, або буде втрачено імплантат.

По-третє, у кожного пацієнта свої анатомічні особливості, і обсяг кісткової тканини для постановки імплантату не завжди буває достатнім.

І, по-четверте, важливо пам'ятати, що для довговічності імплантату необхідно підтримувати ідеальну гігієну порожнини рота, що, м'яко кажучи, виходить далеко не у всіх. Тут ми повертаємося до раніше згаданої проблеми періімплантіта [5] . Виходить свого роду замкнуте коло.

Всі ці недоліки призводять до пошуку альтернативних способів лікування.

Одним з них може стати тканинна інженерія. У цій статті я постараюся підсумувати недавній прогрес, перспективи та основні напрямки розвитку біоінженерії зуба, тобто коротко розповісти про те, що потрібно для створення зуба.

Звідки беруться зуби, або одонтогенез in vivo

Природно, перед тим як розбиратися в біоінженірінге, потрібно розуміти, як зуб розвивається спочатку в організмі людини.

Формування зубів - досить складний процес, який супроводжується тканинним взаємодією і контролюється величезною кількістю сигнальних молекул (рис.3) [6] .

Малюнок 3. Стадії розвитку зуба. В процесі розвитку зуб проходить через наступні стадії: плакоди, нирки, ковпачка, дзвони, стадії розвитку кореня і прорізування. Формування зуба починається в області дентальної пластинки, яка складається з мезенхімальних клітин і інвагінірованного епітелію. На першому етапі з дентальної пластинки утворюється зачаток зуба (стадія плакоди). Під час стадії ковпачка формується первинний емалевий вузол, а на стадії дзвони - вторинні емалеві вузли, які формують горбки майбутніх коронок зубів. Тут же епітеліальні і мезенхімальні клітини зародка зуба диференціюються в амелобласти, одонтобласти і клітини дентального фолікула. Амелобласти і одонтобласти продукують емаль і дентин відповідно. Клітини дентального фолікула диференціюються в клітини тканин періодонта: в периодонтальную зв'язку, цемент і альвеолярну кістку.

Зуб розвивається з тканин, утворених зародковим листком ектодермою. Ділячись і диференціюючи, клітини ектодерми формують структури, необхідні для розвитку зуба: дентальний епітелій і нервовий гребінь, який пізніше перетворюється в мезенхіму. Формування зуба ініціюється і регулюється епітеліально-мезенхімальних взаємодіями. Найраніший ознака розвитку зуба - освіту дентальної пластинки, подковообразного потовщення епітелію уздовж верхньої та нижньої щелеп. Подальші етапи включають стадії плакоди, нирки, ковпачка, дзвони і розвиток кореня [6] , [7] .

У розвитку зуба основну роль грає взаємодія між клітинами епітелію і мезенхіми. Чому ж в процесі розвитку зародка формується саме зуб, а не інший орган, наприклад, кишечник? Вся справа в тому, що клітини, які беруть участь у розвитку зуба, мають одонтогенною компетентністю. Генетична підгрунтя одонтогенних, тобто здатності стовбурових клітин диференціюватися безпосередньо в дентальні клітини, до кінця не з'ясована, хоча виділено більше 200 генів , «Причетних» до розвитку зуба. У багатьох роботах, спрямованих на вивчення даного феномена, також приділяється багато уваги деяким епітеліальних сигнальним центрам. Всього на даний момент ми знаємо про 4 таких центрах: дентальная пластинка, плакода, первинні і вторинні емалеві вузли, основна роль яких полягає в експресії сигнальних молекул, що регулюють формування зуба [8] , [9] .

Негонконгская «Тріада»

Тепер, коли ми так багато знаємо про походження і розвиток зуба, можна перейти безпосередньо до цікавить нас темі - тканинної інженерії.

Тканинна інженерія являє собою сукупність методів і процедур, спрямованих на регенерацію біологічних тканин. Вона включає в себе тріаду основних елементів (рис.4): стовбурові клітини, позаклітинний матрикс або скаффолд (від англ. scaffold - поміст), фактори росту і сигнальні шляхи (signaling) [10] .

Малюнок 4. Тріада тканинної інженерії. Основу тріади тканинної інженерії складають стовбурові клітини, фактори росту і позаклітинний матрикс.

Мета тканинної інженерії - замістити втрачені клітини, тканини і органи, або сприяти їх регенерації, або просто відновити порушену функцію.

Сьогодні ми багато чуємо і читаємо про стовбурові клітини. Це та галузь науки, де ведуть гарячі суперечки. Інформація, яка виходить до споживачів, як правило, не завжди об'єктивна. Що ж насправді являють собою стовбурові клітини, і як і які з них можна використовувати в тканинної інженерії зуба?

Давайте знайомитися: стовбурові клітини - це недиференційовані ембріональні або дорослі (постнатальні) клітини, здатні проходити через величезну кількість клітинних поділів, перебуваючи в недиференційованому стані, а також утворювати проміжні клітинні типи - попередники, які можуть диференціюватися в різні клітини і створювати повноцінні тканини і органи (рис.5) [10] , [11] .

Малюнок 5. Класифікація стовбурових клітин по здатності до диференціювання. Стовбурові клітини за масштабом диференціювання ділять на тотипотентність, плюрипотентні, мультипотентні і уніпотентние. Тотипотентність клітини здатні диференціюватися в будь-який тип клітин дорослого організму. Плюрипотентні клітини можуть продукувати спеціалізовані клітини трьох зародкових листків (ектодерми, ендодерми і мезодерми), але не цілий організм. Мультипотентні клітини продукують обмежений набір типів клітин. Уніпотентние клітини здатні до диференціювання тільки в один вид клітин [13] .

Першу клітинну лінію ембріональних стовбурових клітин виділили в далекому 1998 року [12] . Насправді, не так вже й давно, а з точки зору ходу історії можна сказати зовсім недавно, але прогрес колосальний [10] .

Ембріональні стовбурові клітини виділяють з бластоцисти протягом розвитку ембріона. Вони дають зростання трьом зародковим верствам: екто-, ендо- та мезодермі. Ці клітини тотипотентність, тобто вони можуть розвинутися в кожен з понад 200 типів клітин дорослого організму [10] .

Зараз відомо 3 джерела ембріональних стовбурових клітин ссавців: клітини, виділені з внутрішньої клітинної маси бластоцисти; клітини тератом і первинні статеві клітини зародка [10] .

Як було раніше згадано, стовбурові клітини бувають не тільки ембріональні, але і постнатальні. Що стосується «дорослих» стовбурових клітин, то вони існують в організмі в різних тканинах, включаючи кістковий мозок, кровоносні судини, печінку, шкіру, жирову тканину і дентальні тканини. Вони локалізовані в спеціальних нішах, де йде регуляція їх проліферації, міграції та термінів життя. Постнатальні стовбурові клітини мультипотентні, тобто дають зростання тільки одного типу клітин.

Дентальниє стовбурові клітини є популяцію постнатальних мезенхімальних стовбурових клітин (МСК), що володіють здатністю до самовідновлення і диференціювання [4] , [14] . Залежно від локалізації депо МСК (рис. 6) [15] , Вони поділяються на:

• стовбурові клітини пульпи ;
• стовбурові клітини апикального сосочка;
• стовбурові клітини віддалених молочних зубів;
• клітини-попередники зубного фолікула;
• стовбурові клітини периодонтальної зв'язки;
• МСК, отримані з альвеолярного відростка ;
• МСК ясна;
• прогеніторні клітини (МСК, спрямовані на диференціювання тільки в певний тип клітин) зубного зачатка.

Малюнок 6. Стовбурові клітини зуба. Схематичне зображення джерел дентальних стовбурових клітин. Розшифровку абревіатур дивіться в урізанні нижче.

Зупинимося на деяких з них.

Стовбурові клітини пульпи можна досить легко виділити з пульпи видалених зубів. Вони являють собою дуже привабливий і перспективний джерело аутологічних стовбурових клітин і можуть застосовуватися як для регенерації дентину, пульпи і цементу, так і для відновлення кісткової тканини [15] . Крім цього вони виявляють сильну нейрорегенератівную активність, що представляє особливу цінність при лікуванні ушкоджень спинного мозку: МСК пульпи крім придушення раннього запальної відповіді інгібують апоптоз нейронів, астроцитів і олигодендроцитов після травми, що призводить до збереження нервового волокна і мієлінової оболонки. Також встановили, що вони сприяють регенерації перерізаних аксонів. Таким чином, вчені припускають, що МСК пульпи зможуть забезпечити значні терапевтичні переваги в лікуванні травм спинного мозку [16] .

Стовбурові клітини віддалених молочних зубів - це постнатальная популяція стовбурових клітин з високою проліферативною здатністю, високою життєздатністю і потенціалом многолинейной диференціації (наприклад, в остеобласти, нейронні клітини і одонтобласти) [15] .

Мезенхімальні стовбурові клітини ясна ідеально підходять для відновлення пошкоджених тканин пародонту, м'язів і навіть сухожиль. Але поки не зовсім ясно, чи здатні вони формувати клітини дентину і пульпи [15] .

Прогеніторні клітини зубного зачатка - відносно нова популяція стовбурових клітин, яку виявили в мезенхіми зачатків третього моляра на стадії дзвони. Вони показують таку ж багаторівневу диференціацію, як і інші МСК зуба, включаючи здатність до диференціювання в адипоцити, остеобласти, одонтобласти, хондроцити і нейрони, а також можуть диференціюватися в клітини з морфологічними, фенотипическими і функціональними характеристиками гепатоцитів. Звідси припускають, що даний тип стовбурових клітин в майбутньому зможуть використовувати для лікування захворювань печінки [15] .

Таким чином, кожен тип дентальних стовбурових клітин має свої особливості і сфери застосування не тільки в стоматології, а й в інших областях медицини.

Кроме опис вищє МСК, в тканінної інженерії Використовують и індуковані плюріпотентні стовбурові Клітини (ІПСК), отрімані з соматичних клітін. Вперше про них заговорили в 2006 году, коли Японські Вчені Кадзутосі Такахасі и Сін'я Яманака показали, что соматичні Клітини можна перепрограмуваті в ІПСК с помощью Посилення експресії питань комерційної торгівлі факторів транскріпції (Oct3 / 4, Sox2 и Klf4) [17] , [18] . Самі по Собі ЦІ Клітини імунологічно нейтральні и, что НЕ Менш важліво, що не віклікають таких етичним суперечок, як стовбурові ембріональні Клітини. Однако для їх перепрограмування вікорістовувалі вірусніх агентів, что могло спричинитися за собою формирование новоутворень [19] . Були спроба использование вместо вірусів хімічніх молекул [20] , Але, на жаль, Відсоток успішного репрограммірованія оказался невеликий. Зараз розвивають нові способи отримання ІПСК, оскільки їх застосування виглядає досить привабливим і досить багатообіцяючим.

Що нам варто зуб побудувати?

Для використання стовбурових клітин в тканинної інженерії необхідна наявність скаффолда і ростових факторів (рис. 7). Ідеальний скаффолд повинен підтримувати прикріплення, міграцію, проліферацію і просторову організацію клітин.

Малюнок 7. Що нам варто зуб побудувати?

В основному, скаффолд як відповідний матрикс для реконструкції тканин повинен відповідати наступним вимогам [21] :

1. Простота использование.
2. Наявність пір певної форми і розміру для дифузії клітин, ростових факторів, поживних речовин і видалення продуктів життєдіяльності.
3. Здатність до біодеградації, яка відбувається в певний час без вивільнення токсинів.
4. Біосумісність з тканинами організму.
5. Низька імуногенність.
6. Здатність до заміщення регенерує тканиною і васкуляризації.
7. Хороші фізичні і механічні властивості.

Матеріали, використовувані для формування скаффолдов, поділяють на натуральні і синтетичні (рис. 8) [22] . Біоактивне скло, полімолочна кислота, різні композити (багатокомпонентні матеріали, в основі яких - матриця на основі металу, полімеру або кераміки) - все це синтетичні матеріали. Незважаючи на те, що ці матеріали дозволяють виготовляти скаффолди необхідної форми, їх застосування досить обмежена через незадовільну біосумісності і токсичності. З біоматеріалів (натуральних матеріалів), що використовуються для створення скаффолдов, можна виділити колаген, хітозан, гіалуронову кислоту. Вони складаються з макромолекул, які також входять до складу екстраклеточной матриксу, тому біосумісні і добре біодеградіруемие. Однак вони менш міцні і здатні викликати реакції відторгнення [21] .

Малюнок 8. Тривимірний скаффолд зубів миші і людини. а - Нижній центральний різець миші. б - Нижній перший моляр людини. Використано 3D-реконструкція і біопечать. Матеріал - гідроксиапатит і полікапролактон. Візуалізуються мікроканали (d = 200 нм), в які вводять МСК і фактори росту (в і г).

Найбільш підходящим і таким, що відповідає на більшість вимог скаффолдом є або скаффолд, отриманий з екстраклеточной матриксу (ЕКМ-скаффолд), або його аналог. За рахунок своєї ідентичності з позаклітинним матриксом такі скаффолди здатні забезпечити найкращу взаємозв'язок з клітинами і ростовими факторами. Дентальниє МСК, такі як стовбурові клітини пульпи і періодонта, при культивуванні в ЕКМ-скаффолдах проходили диференціювання в одонтогенном напрямку. Після імплантації ж даного скаффолда формувалася пульпа [10] , [23] .

Крім скаффолда і стовбурових клітин, необхідно зв'язує їх ланка, яке б регулювало зростання тканини. Таким можуть бути фактори росту, певні гени і интерферирующие РНК [7] .

Фактори зростання - пептидні молекули, що передають сигнали для управління клітинним поведінкою і взаємодіючі зі специфічними рецепторами на поверхні клітин [24] . Вони забезпечують взаємозв'язок і взаємодія між клітинами і екстраклеточной матриксом. Слідом за пошкодженням клітини починається секреція ростових факторів, що запускають в подальшому процеси регенерації і ангіогенезу. Прикладом «роботи» чинників зростання в зубі можна назвати освіту вторинного і третинного дентину, яке відбувається при близькому розташуванні каріозної порожнини до пульпи зуба або при підвищеній стертості зубів. Серед ключових факторів зростання під час розвитку зуба можна виділити кістковий морфогенетичний білок (BMP), тромбоцитарний фактор росту (PDGF) і фактор росту фібробластів (FGF). Саме їх в першу чергу використовують в тканинної інженерії зуба [25-27] . Для доставки чинників зростання можуть використовувати як клітини і наночастинки, так і сам скаффолд.

рецепт готовий

Ось і все, якщо коротко, що необхідно для створення зубів. Таким чином, рецепт зі створення зуба виглядає приблизно так:

• Стовбурові клітини - асорті
• Скаффолд - натуральний продукт
• Фактори зростання - за смаком

Технології регенеративної медицини прогресують неймовірно швидко. І вже зараз розроблені, напевно, самі основні положення для тканинної інженерії зуба. Всі вони походять з наших знань про клітинних і молекулярних основах розвитку зуба. Ми розуміємо, що найкращого результату в біоінженірінге зуба можна досягти тільки в присутності двох типів клітин, а не одного: це і клітини епітелію, і мезенхімальні клітини (куди ж без них?) [28] . Однак на одних клітинах зуб не побудуєш. Таким чином, тут не можна виключати роль факторів росту і позаклітинного матриксу. На щастя, наука не стоїть на місці, і нові положення активно розробляють. Можливо, найближчим часом скарбничка знань під назвою «тканинна інженерія зуба» поповниться черговий не менше цінної «монетою».

Але, не дивлячись на весь багатообіцяючий потенціал тканинної інженерії в стоматології, треба буде розв'язати ще завдання, пов'язані з проведенням клінічних випробувань, з іннервацією і кровопостачанням біоінженерного зуба, його зв'язковим апаратом, термінами його прорізування, а також з вибором пулу стовбурових клітин і технології роботи з ними , і ще ряд інших не менш нагальних завдань [10] , [29] .

Що стосується самого основного, а саме стовбурових клітин: в проведених експериментах (варто відзначити, що практично всі вони проведені на мишах), в основному, використовували ембріональні стовбурові клітини. Але в клініці їх застосування різко лімітовано, в тому числі законодавчо. Тому залишаються тільки постнатальні стовбурні клітини (не рахуючи ІПСК, де теж не все спокійно), і тут перед нами виникає наступна проблема: на відміну від мишей, у людини відсутній ніша дентальних стовбурових клітин, саме тому наші зуби не мають здатності до постійного зростання. Ті МСК, які придатні для використання, можна отримати без пошкодження зуба або вже тим більше в тому випадку, якщо зуб раніше лікували ендодонтично, тобто з видаленням пульпи. Ті ж, до яких доступ відкритий, не володіють одонтогенною компетентністю, наприклад, МСК ясна. Це тільки одна з дилем, які ще належить вирішити (рис.9).

Малюнок 9. Боротьба за здорові зуби людства.

Вперед в майбутнє!

Звичайно ж, не викликає сумніву той факт, що незабаром біоінженірінг зубів стане невід'ємною частиною стандартних протоколів лікування уражень зубів. Можливо, що методики регенеративної стоматології дозволять нам створити повноцінний зубодесневой комплекс. Важливо пам'ятати, що методи, розроблені відповідно до вимог і завданнями біоінженерії зуба, зможуть прискорити розвиток нових підходів в регенерації інших тканин і органів і таким чином посприяти прогресу не тільки в стоматології, а й в області регенеративної медицини в цілому. Ну що ж, вперед в майбутнє!

1. Здоров'я порожнини рота . (2012). Інформаційний бюлетень ВООЗ №318;
2. Irish JD (2004). A 5,500-year-old artificial human tooth from Egypt: a historical note . Int. J. Oral Maxillofac. Implants. 19, 645-647;
3. Joel D Irish, Michal Kobusiewicz, Romuald Schild, Fred Wendorf. (2003). Neolithic Tooth Replacement in Two Disturbed Burials from Southern Egypt . Journal of Archaeological Science. 30, 281-285;
4. J Han, D Menicanin, S Gronthos, PM Bartold. (2014 року). Stem cells, tissue engineering and periodontal regeneration . Aust Dent J. 59, 117-130;
5. A.-H. Yen, PC Yelick. (2011). Dental Tissue Regeneration - A Mini-Review . Gerontology. 57, 85-94;
6. Nelson Monteiro, Pamela C. Yelick. (2017). Advances and perspectives in tooth tissue engineering . J Tissue Eng Regen Med. 11, 2443-2461;
7. J. Jernvall, I. Thesleff. (2012). Tooth shape formation and tooth renewal: evolving with the same signals . Development. 139, 3487-3497;
8. Marianna Bei. (2009). Molecular genetics of tooth development . Current Opinion in Genetics & Development. 19, 504-510;
9. Anamaria Balic, Irma Thesleff. (2015). Tissue Interactions Regulating Tooth Development and Renewal . Current Topics in Developmental Biology. 157-186;
10. I. Yu. Malyshev, OO Yanushevich. (2017). Tissue engineering of the tooth: directions of development, achievements and unresolved problems . Stomat. . 96, 72;
11. AM Wobus. (2005). Embryonic Stem Cells: Prospects for Developmental Biology and Cell Therapy . Physiological Reviews. 85, 635-678;
12. JA Thomson. (1998). Embryonic Stem Cell Lines Derived from Human Blastocysts . Science. 282, 1145-1147;
13. Стовбур і гілки: стовбурові клітини ;
14. Lymperi S. (2013). Dental Stem Cells and their Applications in Dental Tissue Engineering . TODENTJ. 7, 76-81;
15. Elna Paul Chalisserry, Seung Yun Nam, Sang Hyug Park, Sukumaran Anil. (2017). Therapeutic potential of dental stem cells . Journal of Tissue Engineering. 8, 204173141770253;
16. Akihito Yamamoto, Kiyoshi Sakai, Kohki Matsubara, Fumiya Kano, Minoru Ueda. (2014 року). Multifaceted neuro-regenerative activities of human dental pulp stem cells for functional recovery after spinal cord injury . Neuroscience Research. 78, 16-20;
17. Kazutoshi Takahashi, Koji Tanabe, Mari Ohnuki, Megumi Narita, Tomoko Ichisaka, et. al .. (2007). Induction of Pluripotent Stem Cells from Adult Human Fibroblasts by Defined Factors . Cell. 131, 861-872;
18. Kazutoshi Takahashi, Shinya Yamanaka. (2006). Induction of Pluripotent Stem Cells from Mouse Embryonic and Adult Fibroblast Cultures by Defined Factors . Cell. 126, 663-676;
19. Satoshi Nori, Yohei Okada, Soraya Nishimura, Takashi Sasaki, Go Itakura, et. al .. (2015). Long-Term Safety Issues of iPSC-Based Cell Therapy in a Spinal Cord Injury Model: Oncogenic Transformation with Epithelial-Mesenchymal Transition . Stem Cell Reports. 4, 360-373;
20. J. Yu, K. Hu, K. Smuga-Otto, S. Tian, ​​R. Stewart, et. al .. (2009). Human Induced Pluripotent Stem Cells Free of Vector and Transgene Sequences . Science. 324, 797-801;
21. Sarang Sharma. (2014 року). Biomaterials in Tooth Tissue Engineering: A Review . JCDR;
22. K. Kim, CH Lee, BK Kim, JJ Mao. (2010). Anatomically Shaped Tooth and Periodontal Regeneration by Cell Homing . J Dent Res. 89, 842-847;
23. Bei Chang, Neelam Ahuja, Chi Ma, Xiaohua Liu. (2017). Injectable scaffolds: Preparation and application in dental and craniofacial regeneration . Materials Science and Engineering: R: Reports. 111, 1-26;
24. Fa-Ming Chen, Ying An, Rong Zhang, Min Zhang. (2011). New insights into and novel applications of release technology for periodontal reconstructive therapies . Journal of Controlled Release. 149, 92-110;
25. Kathryn D. Kavanagh, Alistair R. Evans, Jukka Jernvall. (2007). Predicting evolutionary patterns of mammalian teeth from development . Nature. 449, 427-432;
26. Pauliina M. Munne, Szabolcs Felszeghy, Maria Jussila, Marika Suomalainen, Irma Thesleff, Jukka Jernvall. (2010). Splitting placodes: effects of bone morphogenetic protein and Activin on the patterning and identity of mouse incisors . Evolution & Development. 12, 383-392;
27. Ruch JV, Lesot H., Bègue-Kirn C. (1995). Odontoblast differentiation . Int. J. Dev. Biol. 39, 51-68;
28. Nelson Monteiro, Pamela C. Yelick. (2017). Advances and perspectives in tooth tissue engineering . J Tissue Eng Regen Med. 11, 2443-2461;
29. Masamitsu Oshima, Takashi Tsuji. (2015). Whole Tooth Regeneration as a Future Dental Treatment . Engineering Mineralized and Load Bearing Tissues. 255-269.