Лабораторна діагностика сифілісу

1. Прямі методи виявлення T.pallidum
2. Пряма імунофлуоресценція (ПІФ)
3. Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР)
4. RIT (rabbit infectivity test)
5. Серологічна діагностика сифілісу
6. Нетрепонемні тести (НТТ)
7. РСК забезпечує
8. РМП (реакція мікропреципітації)
9. Рідкісні для Росії нетрепонемні серологічні тести
10. USR-тест (Unheated serum reаgins)
11. TRUST (Toluidin Red Unheated Serum test)

Для діагностики сифілісу використовують методи, що дозволяють виявити збудника (пряма детекция) або зафіксувати антитільний відповідь організму на впровадження блідої трепонеми (серологічна діагностика).

Сифіліс - інфекційне захворювання, що викликається блідою трепонемой (Treponema pallidum), що передається переважно статевим шляхом і характеризується періодичністю перебігу.

Для діагностики сифілісу використовують методи, що дозволяють виявити збудника (пряма детекция) або зафіксувати антитільний відповідь організму на впровадження блідої трепонеми (серологічна діагностика).

Прямі методи виявлення T.pallidum

Мікроскопічне дослідження в темному полі

Вперше мікроскопічне дослідження нативних препаратів в темному полі було запропоновано AC Coles в 1909 році. Метод має високу чутливість (75%) і специфічність (80%). Матеріалом для дослідження служить тканинна рідина - серозне відокремлюване (серум) з ерозивновиразкових елементів або рідина (пунктат) з лімфовузлів.

Взяття матеріалу для дослідження на бліду трепонем частіше здійснюється методом роздратування висипного елемента, якщо він має схильність до мацерації. При цьому необхідно попередньо звільнити поверхню виразки, ерозії або папули від кірочок, можливого забруднення застосовувалися пацієнтом зовнішніми засобами.

Щоб не викликати зайве кровотеча, робити це слід обережно, користуючись стерильними ватно-марлевими тампонами, змоченими фізіологічним розчином хлориду натрію. Очищену поверхню, що підлягає дослідженню, просушують тампоном і за допомогою мікробіологічної петлі обережно масажують у краю до тих пір, поки не з'явиться тканинна, з незначною опалесценцією рідина, з якої готують матеріал для дослідження.

З немацерірованних елементів, що висипали матеріал для дослідження на бліду трепонем отримують методом скарификации за допомогою скальпеля. Цей спосіб застосовується нечасто, тому що значна домішка крові до тканинної рідини ускладнює знаходження в препараті блідих трепонем. Якщо провести дослідження на бліду трепонем безпосередньо з поверхні шанкру неможливо (заепітелізірована елемент, відсутність ерозії або виразки), то при наявності підозрілого на сифілітичний пахового склераденита з метою отримання матеріалу може бути рекомендована пункція лімфатичного вузла.

Для цього користуються шприцом з щільно пригнаний поршнем і голкою зі злегка затупленим кінцем. Місце проколу обробляють спиртом і 3% розчином йоду. Лімфатичний вузол фіксують між 1-м і 2-м пальцями лівої руки. Правою рукою голку вколюють паралельно поздовжньої осі лімфатичного вузла. Не виймаючи голку, лівою рукою злегка масажують лімфатичний вузол, потім голку дуже повільно витягують з нього, виробляючи аспирируется руху поршнем шприца. При цьому в просвіті голки виявиться матеріал, необхідний для дослідження на бліду трепонем.

Мікроскопія в темному полі проводиться за допомогою світлового мікроскопа, обладнаного спеціальної конденсорною лінзою, що створює своєрідний світловий ефект. Він заснований на феномені Тиндаля: вузька смуга світла при проходженні через темний простір висвічує все, що виявляється на її шляху, при цьому стають видимими навіть найдрібніші частинки, які при звичайному освітленні побачити неможливо.

Взятий матеріал повинен бути досліджений негайно в нативному стані, оскільки трепонеми легше виявляються, поки вони живі, завдяки їх характерним рухам, що відрізняє їх від трепонем - сапрофітів. Препарати для дослідження в темному полі зору необхідно готувати на тонких добре знежирених стеклах. Якщо матеріалу мало, наприклад, при пункції лімфатичного вузла, його змішують з однією краплею ізотонічного розчину хлориду натрію.

Краплю накривають покривним склом. Дослідження проводять із сухою системою (об'єктив 40, окуляр 10). На темному тлі бліда трепонема має вигляд тонкої ніжної сріблястою спіралі, що здійснює плавні маятнікообразние, згинальні а також обертальні і поступальні рухи.

До переваг методу мікроскопічного дослідження в темному полі відносяться: короткі терміни проведення дослідження і відносна дешевизна. Слід, однак враховувати і такі його недоліки: необхідна наявність висококваліфікованого навченого персоналу, метод ефективний лише при свіжих (первинний, вторинний, ранній вроджений сифіліс) формах захворювання, не забезпечує кількісний облік змісту трепонем в організмі хворого і, отже, його не можна використовувати в подальшому для вивчення динаміки патологічного процесу в ході терапії.

Позитивний результат мікроскопічного дослідження в темному полі розглядається як підстава для встановлення діагнозу і призначення лікування. При негативному результаті показано повторне (до 3 разів) дослідження після застосування примочок фізіологічним розчином. Негативний результат не є підставою для виключення діагнозу сифілісу і вимагає подальшого підтвердження методами серологічної діагностики.

Існують також методи детекції фіксованою блідої трепонеми, які застосовуються для дослідження як мазків, так і гістологічних препаратів (метод забарвлення Романівського - Гимзе, метод сріблення Морозова та інші). Ці методи, в силу їх трудомісткості, використовуються в основному в наукових дослідженнях [2, 7, 9].

Пряма імунофлуоресценція (ПІФ)

Вперше метод прямої імунофлюоресценції для детекції T. pallidum при люмінесцентної мікроскопії в темному полі був запропонований в 1969 році DS Kellog і SM Mothershed. Надалі в 1985 році EW Hook зі співавторами розробив метод прямої імунофлюоресценції для детекції T. pallidum з використанням моноклональних антитіл при люмінесцентної мікроскопії в темному полі. Метод ПІФ проводиться із застосуванням мічених барвником протитрепонемних антитіл.

Ці флюоресцентні моноклональні антитіла можуть застосовуватися для виявлення патогенних трепонем як в мазках серозного відокремлюваного сифилидов, так і в тканинних зрізах у пацієнтів з шкірними проявами сифілісу, ураженнями лімфатичних вузлів і різних органів. Серозна рідина або біопсійний матеріал наноситься на предметне скло, висушується, фіксується метанолом або ацетоном і потім обробляється протитрепонемних моноклональними або поліклональних антитіл, кон'югованими з флюоресцирующим барвником (флюоресцеин ізотіоцианатом). Після відмивання препарати висушуються і проглядаються в люмінесцентному мікроскопі.

У Росії даний метод мало використовують через відсутність промислового виробництва та сертифікації відповідних інгредієнтів, зокрема, мічених моноклональних антитіл до патогенної бліда трепонема.

Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР)

Метод ПЛР, запропонований в 1983 році співробітником фірми «Cetus» (США) K. Mullis, полягає в ампліфікації в пробірці певних ділянок ДНК збудника в процесі повторюваних температурних циклів. На кожному етапі знову синтезовані молекули копіюються ферментом ДНК-полімеразою, завдяки чому відбувається багаторазове подвоєння специфічних фрагментів ДНК діагностується мікроорганізму.

Полімеразна ланцюгова реакція застосовується для визначення специфічних послідовностей ДНК, що діагностується збудника. Об'єктом для даного дослідження може бути серозна тканинна рідина, пунктат лімфовузлів, спинномозкова рідина, а також гомогенати тканин внутрішніх органів (біопсійний або аутопсійного матеріал), піддані спеціальній пробопідготовці. ПЛР-тести для виявлення ДНК Treponema pallidum були розроблені в 1991 році одночасно в декількох лабораторіях (E. Grimprel і співавт .; GT Noordhoek і співавт.).

Метод ПЛР є великою цінністю, так як дозволяє виявляти не тільки поодинокі трепонеми, але навіть їх фрагменти. Це особливо важливо при діагностиці вродженого і нейросифилиса, коли серологічні методи можуть бути неефективними.

До складу діагностичного набору для ПЛР входять праймери, фланкирующие на різних ланцюгах ДНК шукану послідовність (амплікон), ДНК-залежна ДНК-полімераза (Taq-полімераза) з термофільних бактерій (Thermus aquaticus), нуклеотиди, буферні розчини, а також сама ПЛР-тест -система (наприклад Амплісенс Treponema pallidum, Росія).

ПЛР проводиться в кілька етапів: денатурація ДНК, отжиг праймерів і елонгація або синтез. Перший етап - денатурація. ДНК в досліджуваному зразку денатурує зазвичай при 95̊ С, перший цикл 60 сек., Наступні цикли по 15 сек. При цьому подвійна спіраль молекули ДНК розділяється на дві комплементарні нитки, кожна з яких містить кілька сот тисяч нуклеотидів.

Наступною сходинкою ПЛР є так званий «отжиг» - приєднання запалів (праймерів). Праймери представляють собою невеликі синтетичні фрагменти однонитчатим ДНК, кожен з яких містить близько 20 - 30 нуклеотидів. Вони підібрані так, що один з них комплементарен 3 '- кінця однієї з ниток ДНК, а інший - 3' - кінця іншої нитки двухспіральной ланцюжка ДНК діагностується мікроорганізму.

Праймери приєднуються до комплементарних ділянок довгих одинарних ниток ДНК ( «отжиг»), і, таким чином, на цьому короткому відрізку формується подвійна спіраль. Цей процес йде при 40 - 60̊ С, температура залежить від довжини праймерів і послідовності підстав. Праймери зазвичай несуть мітку, наприклад біотин-авидин-пероксидазний комплекс, візуалізується при проведенні кольорової реакції.

Наступний етап - подовження праймерів і освіту мічених двунитчатую молекул ДНК. Цей процес йде в присутності попередників синтезу ДНК-нуклеотидів, що містять чотири типи підстав - аденін, тимін, гуанін і цитозин, а також термостабільної Tag-полімерази - ферменту, отриманого з штаму бактерій Thermus aquaticus, виділених з гарячих джерел Йеллоустонского національного парку (при отриманні великої кількості ферменту використовувалися методи генної інженерії).

Оптимальна температура дії Tag-полімерази 72̊ С, але він працює навіть при температурі 92̊ С, при якій проводиться денатурація. Цей етап ПЛР називається «подовження» і призводить до утворення нової дволанцюгової молекули ДНК, одна нитка якої належить вихідного матеріалу, а інша синтезована як продовження праймера і містить мітку. При кожному наступному циклі кількість молекул ДНК подвоюється.

Основними достоїнствами ПЛР є її універсальність (можливість виявити будь-які нуклеїнові кислоти), вельми висока чутливість (80 - 94,7%) і висока (до 100%) специфічність. До цього слід додати швидкість отримання результату (актуальність відповіді), мінімальний (кілька мікролітрів) обсяг проби для аналізу, можливість одночасного дослідження декількох збудників захворювань, а також отримання документального відповіді у вигляді фотографій і внесення результатів діагностики на комп'ютерні інформаційні носії.

До недоліків методу ПЛР - аналізу, слід віднести високі вимоги до оснащення лабораторії, якості тест-наборів, регламенту дослідження [2, 3, 11].

RIT (rabbit infectivity test)

Зараження сифілісом кроликів є найстарішим методом прямого виявлення T. pallidum в будь-якому клінічному матеріалі за умови, якщо пацієнтові не була розпочата антибактеріальна терапія. Ефективність методу пояснюється високою чутливістю цих експериментальних тварин до зараження блідою трепонемой: якщо число мікроорганізмів в матеріалі перевищує 23, чутливість методу досягає 100%; в той же час наявності 2 - 3 трепонем досить для інфікування майже половини інокульованої тварин.

Однак використання цього методу з метою клінічної лабораторної діагностики сифілісу досить обмежена через тривалість отримання результату, високу вартість, і необхідність утримання великої, добре обладнаного віварію. В даний час метод застосовують за кордоном в одиничних дослідних лабораторіях для оцінки чутливості інших методів [3].

Серологічна діагностика сифілісу

Серологічні методи підрозділяють на нетрепонемні і трепонемні, відбіркові та підтверджують. Слід згадати про важливу особливість серологічних методів діагностики сифілісу - всі вони, незалежно від ефективності використовуваних інгредієнтів, тест-систем, приладів або візуальної оцінки результату, є непрямими, непрямими, тобто виявляють антитіла, що утворюються у відповідь на присутність в організмі блідої трепонеми. З метою підвищення достовірності результату і, з огляду на відповідальність, соціальну значимість результату, а також небезпека захворювання їх проводять в комплексі.

Нетрепонемні тести (НТТ)

РСК з КА (реакція зв'язування комплементу з кардіоліпіновим антигеном); реакція Вассермана.

Реакція зв'язування комплементу була розроблена J. Bordet і О. Gangou (1901), які показали, що при утворенні комплексу «антиген - антитіло» відбувається адсорбція комплементу. Надалі А. Wasserman спільно з А. Neisser і C. Bruck в 1906 році адаптував реакцію використавши екстракт печінки новонароджених з вродженими сифілісом. Після робіт M. Pangborn (1941), що виділила і очистила кардиолипин, що в подальшому дозволило стандартизувати кардиолипин-лецитин-холестериновий антигенний комплекс, в РСК стали застосовувати комерційні препарати кардіоліпінового антигену.

Для постановки реакції необхідні такі інгредієнти: випробувана сироватка, антигени, комплемент, гемолітична сироватка, кров барана (еритроцити). В реакції використовуються сироватки крові пацієнтів, прогріті при + 56̊ С для інактивації комплементу. Механізм реакції полягає в зв'язуванні реагінових антитіл тестованої сироватки з кардіоліпіновим антигеном, що утворився імунний комплекс здатний зв'язувати дозований доданий в систему комплемент морської свинки.

Як індикатор в реакцію вводиться гемолітична система (еритроцити барана з гемолітичною сироваткою). У разі зв'язування комплементу утворився імунним комплексом гемолізу не спостерігається (реакція позитивна), а при наявності вільного комплементу в реакційній суміші внаслідок відсутності в досліджуваній сироватці реагинов спостерігається гемоліз еритроцитів (реакція негативна).

Для позначення ступеня позитивності реакції Вассермана користуються системою чотирьох плюсів:

1. повна затримка гемолізу - 4+ (різко позитивна реакція); 2. значна затримка гемолізу - 3+ (позитивна реакція); 3. часткова затримка гемолізу - 2+ (слабоположітельная реакція); 4. незначна затримка гемолізу - 1+; 5. сумнівна реакція - ±.

Негативний результат реакції характеризується повним гемолізом.

РСК з кардіоліпіновим антигеном може бути поставлена ​​в якісному і кількісному (з різними розведеннями сироватки) варіантах. Кількісна постановка використовується для контролю за ефективністю терапії (зниження титру реагінових антитіл - серонегатівація). Крім сироватки крові в реакції можуть бути використані зразки спинномозкової рідини. Для збільшення чутливості РСК може ставитися на холоді.

РСК забезпечує

• можливість не тільки встановити діагноз, а й уточнити термін зараження при первинному сифілісі;
• постановку діагнозу при прихованій формі захворювання;
• оцінку ефективності проведеної терапії.

Чутливість і специфічність РСК в певній мірі обмежені:

• РСК позитивна приблизно в 70% випадків при первинному сифілісі (через 1 - 4 тижні після появи шанкра);
• негативна майже у 30% пацієнтів з пізнім (третинним) сифілісом;
• дає високий відсоток хибнопозитивних реакцій.

До недоліків реакції відносяться:

1. складність постановки;
2. залежність оцінки інтенсивності реакції від кваліфікації та психофізіологічного стану лабораторних працівників;
3. неможливість автоматизації;
4. низька відтворюваність.

Реакція Вассермана прослужила людству рівно 100 років. З 2006 року, згідно з наказом №87 МОЗ РФ від 26.03.2001 року «Про вдосконалення серологічної лабораторної діагностики сифілісу», РСК була замінена менш трудомісткими кардіоліпінового тестами - RPR, МРП, VDRL і ін. РСК залишилася в постановці лише в окремих лабораторіях.

Вона може бути корисна при встановленні діагнозу пізніх форм сифілісу і дослідженні ліквору, коли вона більш чутлива, ніж інші нетрепонемні тести. Найбільш споживані в даний час в Росії МРП і RPR, які описуються нижче. Реакції ці є аналогами і відрізняються один від одного лише деякими технічними деталями. Всі сучасні НТТ, в тому числі RPR і МРП, є реакціями флокуляції.

Швидкий плазмареагіновій тест БУВ запропонованій J. Portnoy з співавт. (1957) для масового и Швидкого скринінгу зразків Сироватко або плазми крови в польових условиях. У 1961 році ті ж автори запропонували модифікацію RPR-тесту в постановці на спеціальних картонних картках з видавленими круглими плоскими неглибокими лунками діаметром 18 мм.

RPR-тест відноситься до макроскопічних нетрепонемних флокуляційно тестів. У стабілізований стандартний кардіоліпіновий антиген додані частинки дрібнодисперсного вугілля, який дозволяє візуалізувати флокули і врахувати результати реакції неозброєним оком. В стандартно випускаються комерційних наборах термін придатності антигену, що застосовується в RPR-тесті, зазвичай становить 18 місяців.

Постановка реакції вкрай проста. При якісної постановки на кожен окреслений гурток картки наноситься 50 мкл нерозведеної досліджуваної плазми або сироватки крові. RPR-тест непридатний для дослідження ліквору. За допомогою доданих одноразових паличок або піпеток - меланжери зразок рівномірно розподіляється по поверхні лунки.

Потім за допомогою доданого диспенсера з дозуючої голкою на поверхню кожного гуртка після ретельного збовтування наносять по 1 краплі суспензії RPR-антигену. Можливий і інший варіант, коли на поверхню картки наносять окремо краплю досліджуваного зразка і краплю RPR-антигену, і тільки потім за допомогою шпателя або палички їх змішують, рівномірно розподіляючи по всій окресленої поверхні гуртка діаметром 18 мм.

Вважається, що перший варіант постановки в ряді випадків дозволяє уникнути феномена Прозона, оскільки попередній розподіл зразка досліджуваної сироватки (плазми) скорочує локальну концентрацію антитіл в місці додавання антигену, створюючи оптимальні локальні умови для початку формування флокулята.

Для стандартизації умов проведення реакції і скорочення часу отримання результату рекомендується використовувати орбітальний ротатор, що забезпечує рівномірне перемішування нанесених на картку реагентів: RPR-антигену і досліджуваних зразків, за рахунок плавного ексцентричного обертання платформи зі швидкістю 100 оборотів / хв. Це єдине обладнання, що рекомендується для використання, особливо при масовому скринінгу.

Картку легко розрізати ножицями, відокремивши необхідну кількість лунок для постановки навіть одиничного аналізу. Час отримання відповіді - 8 хвилин. До складу набору зазвичай входять позитивний і негативний контролі, які повинні бути використані при постановці кожної серії аналізів для підтвердження якості тест - системи, а також для порівняння отриманих результатів з контролями.

Облік результатів реакції проводиться візуально при гарному освітленні, коли ще не висохла поверхня гуртка. Читання висохлої картки може призводити до артефактів. Можна проводити погойдують, нахиляючи картку, щоб краще розглянути утворилися агрегати. При утворенні середніх і великих агрегатів результат RPR - тесту враховується як «позитивна реакція», в разі виявлення рідкісних невеликих агрегатів дається висновок «слабоположітельная реакція», а при відсутності видимих ​​агрегатів (рівна сіра поверхню) - «негативна реакція».

Зразки, що дали позитивний результат, а також сумнівні ( «шорсткі») результати рекомендується досліджувати в полуколичественной постановці, готуючи серійні дворазові розведення (1: 2 - 1 1024) досліджуваного зразка плазми або сироватки у фізіологічному розчині (0,85% розчин натрію хлориду ) безпосередньо на картці.

Титром зразка вважається останнє розведення, в якому можна знайти позитивний результат. Значення титру використовується для подальшого контролю ефективності лікування (серонегатівація): після адекватної терапії первинного і вторинного сифілісу титр повинен знижуватися принаймні в 4 рази через три - чотири місяці, і в 8 разів через 6 - 8 місяців. У більшості пацієнтів, пролікованих на ранніх стадіях інфекції, титри знижуються аж до мінімального або порогового рівня чутливості реакції приблизно через рік.

Специфічність RPR-тесту складає 98%, а чутливість залежить від стадії сифілісу і становить при первинному сифілісі 86%, при вторинному - 100%, при прихованому - 98%, при пізньому сифілісі - 73% (S. Larsen з співавт., 1995) .

Переваги RPR-тесту: найвища чутливість серед нетрепонемних тестів при первинному, прихованому і пізньому сифілісі; швидкість отримання відповіді; низька вартість аналізу; зручність постановки реакції, придатність для індивідуальної постановки і для масового скринінгу; наявність готових стандартних наборів (наприклад Люїс RPR тест (Росія), HUMAN (Німеччина), Organon Teknika (Бельгія), Sanofi Diagnostics Pasteur (Франція)); висока стабільність PRP - антигену, великий термін придатності (18 місяців); стандартизація результатів, одержуваних у різних лабораторіях; прекрасна сполучуваність з сучасними підтверджують трепонемная тестами на сифіліс (зокрема з РПГА).

РМП (реакція мікропреципітації)

У Росії РМП з кардіоліпіновим антигеном впроваджена в клінічну практику відповідно до Наказу №1161 МОЗ СРСР від 02.09.1985 року «Про вдосконалення серологічної діагностики сифілісу», однак її використовують при діагностиці сифілісу набагато раніше - з початку 70-х, коли був очищений і синтезований кардіоліпіновий антиген. РМП ставлять з інактивованої сироваткою крові, і з плазмою, причому тільки в день взяття крові з пальця.

Специфічність РМП оцінюється в 98%, а чутливість при різних стадіях сифілісу менше інших стандартних нетрепонемних тестів (RPR) і становить: при первинному сифілісі - 81%; при вторинному - 91%; при прихованому - 94%.

Недоліком РМП можна вважати меншу чутливість в порівнянні з іншими НТТ.

Рідкісні для Росії нетрепонемні серологічні тести

VDRL (за назвою лабораторії - розробника Venereal Disease Research Laboratory)

Перша успішна спроба стандартизації та створення методу для масового скринінгу - мікрофлокулляціонного тесту VDRL - була проведена A. Harris, A. Rosenberg, L. Riedel в 1946 році. В даному тесті свіжоприготований антиген і інактивована сироватка змішуються в скляній лунці механічним обертанням. Якщо в сироватці присутні антитіла до кардіоліпінового антигену, утворюються агрегати у вигляді коротких стержневідной структур, які виявляються мікроскопічно.

Використовується кількісна модифікація VDRL до розведення сироватки 1:64. Результати оцінюють як «реактивні» - при виявленні великих агрегатів, «слабореактівние» - при незначній флокуляції, «нереактивні» - при її відсутності. Кількісна постановка реакції з серією дворазових розведень сироватки фізіологічним розчином дозволяє отримати дані про справжню реактивності сироватки, а також визначити титр (найвище розведення, що дає реактивність), значення якого служить базовою величиною реактивності.

Зміни титру в процесі і після лікування, аж до серонегатіваціі, використовуються в якості критерію ефективності терапії. Специфічність VDRL в середньому становить 98%, чутливість залежить від стадії сифілісу і становить при первинному сифілісі 78%, при вторинному - 100%, при прихованому - 95%, при пізньому сифілісі - 71% (S. Larsen з співавт., 1995). VDRL є єдиним тестом, рекомендованим для дослідження спинномозкової рідини.

Недоліком тесту VDRL можна назвати великі трудовитрати персоналу в зв'язку з необхідністю мікроскопічної реєстрації результатів реакції.

USR-тест (Unheated serum reаgins)

USR-тест - метод детекції реагинов в непрогрітій сироватці. Метод виконаний на основі модифікації антигену, використовуваного в VDRL шляхом додавання холінхлорида і ЕДТА з метою стабілізації антигенного комплексу. Тест придатний для визначення реагінових антитіл не тільки в сироватці, але і в плазмі крові, не вимагає прогрівання біопроб. Як і в VDRL, результати тесту реєструються за допомогою мікроскопа, лупи, агглютіноскопа.

Специфічність тесту - 93 - 99%, чутливість при первинному сифілісі - 80%, вторинному - 100%, прихованому - 95%.

До переваг USR-тесту відноситься:

• можливість дослідження непрогрітій плазми,
• стабільність кардіоліпінового антигенного комплексу,
• висока чутливість.

У Росії застосовується вкрай рідко.

За кордоном також використовується RSТ - реагиновий скринінговий тест, що фактично є модифікацією USR. На відміну від нього, при відсутності візуалізації реакції антиген - антитіло в неї додають липид - розчинну субстанцію [5].

TRUST (Toluidin Red Unheated Serum test)

Фактично модифікація мікрофлоккуляціонного нетрепонемних RPR-теста на картках.

З метою оптимізації візуального обліку (неозброєним оком) результату для приготування антигену використовується мелкодисперсная суспензія водонерозчинного барвника толуїдинового червоного (іноді суданового чорного).

Реакція здійснюється з непрогрітій сироваткою і плазмою крові, однак не застосовується при дослідженні спинномозкової рідини. Час отримання результату близько 10 хвилин. Специфічність тесту - 99%. Чутливість при первинному сифілісі становить близько 85%, вторинному - 100%, прихованому - 98%.

У Росії застосовується в невеликій кількості лабораторій.

Методика зручна, легко здійсненна, немає труднощів в інтерпретації результатів.

Перейти до інших публікацій