Методи визначення чутливості до антибіотиків

1. Методи визначення чутливості до антибіотиків
2. Методи визначення МПК
3. методи розведення
4. Приготування заданих розведень.
5. Додавання бактеріальної суспензії.
6. Інкубація протягом 1-ї ночі
7. Аналіз результатів.
8. дифузійні методи
9. приміщення бактерій
10. Приміщення дисків з антибіотиками
11. Інкубація на добу
12. Аналіз результатів
13. E-TEST
14. Інші методи визначення чутливості до антибіотиків
15. генетичні методи
16. Вам також сподобається:

Лікування антибіотиками можна проводити двома способами. Перший - етіотропний, коли виділено збудника і визначена чутливість його до антибактеріальних агентів. Другий - емпіричний, заснований на знанні природного резистентності , Епідеміологічних даних і результатів чутливості до антибіотиків в регіоні або стаціонарі.

В обох випадках визначення чутливості до антибіотиків - невід'ємний елемент раціональної терапії. У цій статті massmedika розповість про деякі з них.

Методи визначення чутливості до антибіотиків

В основі більшості методів лежить визначення мінімальної переважної концентрації (МПК). МПК (іноді мінімальна інгібуюча концентрація) - найменша концентрація антимікробної агента, яка в пробірці повністю пригнічує видимий неозброєним оком зростання мікроорганізмів. Вимірюється МПК в мг / л або мкг / мл

Методи визначення МПК

До методів визначення МПК відносяться:

1. методи розведення
   1. Методи розведення (дилюції) в бульйоні.
      1. метод мікроділюціі
      2. метод макроділюціі
   2. Методи розведення в агарі
2. дифузійні методи
   1. з використанням дисків з антибіотиками
   2. за допомогою E-тестів.

методи розведення

Нижче наведено алгоритм проведення методу розведення в бульйоні.

Приготування заданих розведень.

Готується бульйон, що містить убуває кількість антибіотика,

також готується контроль, який не містить антибактеріального агента.

Додавання бактеріальної суспензії.

До кожного з розведень антибіотика додається певна кількість виділених бактерій.

Інкубація протягом 1-ї ночі

Пробірки, що містять бульйон, антибіотик і бактерії залишаємо на ніч при t = 35-37о.

Аналіз результатів.

Мутний бульйон засвідчує про зростання бактерій. Мінімальний вміст антибіотика, де бульйон буде вільний від зростання бактерій, буде вважатися МПК для даного штаму.

Процедура аналогічна для методу розведення в агарі. Метод мікроділюціі відрізняється від методу макроділюціі об'ємом іспользуемомого матеріалу.

дифузійні методи

Визначення чутливості диско-дифузійним методом передбачає такі етапи:

приміщення бактерій

Приміщення суспензії бактерії заданої концентрації (1-2 х 108 КУО / мл) в чашку Петрі з агаром.

Приміщення дисків з антибіотиками

Комерційні диски, з нанесеним антибіотиком, поміщаються в чашку Петрі. Диски рівномірно розподілені по поверхні агару. Антибіотик починає миттєво поширюватися з диска на поверхню чашки Петрі, створюючи градієнт концентрації таким чином, що найбільший вміст антибіотика знаходиться біля диска.

Інкубація на добу

Чашка Петрі, яка містить живильне середовище (агар), суспензію бактерії і диски з антибіотиками поміщаються в термостат для інкубації на добу при при t = 35-37о

Аналіз результатів

Оцінка відбувається шляхом вимірювання діаметра зони навколо диска, вільної від росту бактерій. Отриманий результат порівнюють з стандартами для кожного антибіотика і конкретного штаму бактерії.

E-TEST

E-TEST (BioMerieux) - комерційний тест, який представляє з себе смужку з нанесеним антибіотиком. Антибактеріальну речовину наноситься по градієнту концентрації від високого до низького, зі шкалою, що відображає концентрацію антибіотика в даному місці.

E-test - швидкий і простий метод, в той же час досить дорогий, тому що для кожного антибіотика необхідна окрема смужка.

Інші методи визначення чутливості до антибіотиків

Механізм-специфічні тести

Наявність у бактерії певного механізму резистентності може бути визначено механізм-специфічними тестами. Наприклад, наявність b-лактамаз можна визначити в хромогенного тесті на цефалоспорінази (Цефіназний диск від BD Microbiology Systems).

Цефіназний диск буде корисний для визначення резистентності до пеніцилінів / цефалоспоринів у штамів Neisseria gonorrhoeae, Staphylococcus, Haemophilus influenzae, ентерококів і деяких аеробних бактерій. Метод не варто використовувати для виявлення b-лактамаз широкого спектра.

генетичні методи

Так як резистентність закодована в генах, деякі методи генотипування можуть бути використані для їх виявлення. Більшість з генетичних методів є високочутливими і швидкими. Варто однак пам'ятати, що присутність генів резистентності не завжди означає, що терапія буде неефективна. Багато що залежить від ступеня експресії гена резистентності.

Вам також сподобається:

1. Популярне оману про бактериостатических антибіотиках
2. Колістін, механізм дії та резистентності, перспективи використання
3. Фторхінолони - будова, механізми дії і резистентності.
4. Три основних мішені дії антибіотиків